доктор сельскохозяйственных наук, профессор каф. ботаники РГАУ-МСХА имени К.А. Тимирязева
В медицине используются в основном 2 вида – золотарник канадский и широко произрастающая в нашей стране по полям-лугам золотая розга.
Или золотая розга (Solidago virgaurea ) - многолетнее травянистое растение из семейства астровые с коротким деревянистым корневищем. Стебли прямостоячие, чаще неветвящиеся, олиственные, до 100 см высотой. Листья очередные или яйцевидные, заостренные, по краю пильчатые, прикорневые и нижние стеблевые листья сужены в крылатый черешок, верхние более мелкие, сидячие. Цветки желтые, в мелких (до 15 мм) корзинках, собранных в кистевидное или метельчатое соцветие. Плоды - цилиндрические ребристые семянки с буроватым хохолком. Цветет в августе – сентябре.
Встречается по всей европейской части России, кроме Крайнего Севера, на Кавказе и Западной Сибири. Растет в светлых лесах, по опушкам, полянам, вырубкам, среди кустарников, на лугах. Предпочитает не тяжелые по механическому составу почвы. В Восточной Сибири и на Дальнем Востоке замещается близкими видами – золотарником даурским (Solidago dahurica син. Solidago virgaurea var. dahurica) и золотарником низбегающим (Solidago decurrens), которые могут использоваться в медицине благодаря схожему химическому составу наравне с основным видом.
Применяется верхняя часть олиственных побегов, заготовленная во время цветения. Золотарник совершенно не обязательно выращивать на участке, можно просто в конце июля-начале августа собрать и высушить верхние части побегов с соцветиями. Сушат в тени, раскладывая на чердаках или в сушилке, при температуре не выше +35+40 о С. Гомеопаты используют соцветия.
У нас используется в народной медицине и заготавливается дикорастущий. Входит в Фармакопею Германии и некоторых других стран.
Свойства и применение золотарника обыкновенного
Химический состав: органические кислоты, дитерпеноиды, 2,4% сапонинов,фенольные соединения, фенолкарбоновые кислоты и их производные (кофейная, хлорогеновая, гидроксикоричная), до 012% флавоноидов (рутин, кверцетин и др.), кумарины, эфирное масло.
Фармакологическое действие. Обладает сильным мочегонным действием, применяется при заболеваниях почек и мочевого пузыря, особенно часто - при мочекаменной болезни. При этом, наряду с мочегонным действием, проявляет противовоспалительные и сильнейшие антибактериальные свойства. Содержащиеся флавоноиды снижают проницаемость капилляров. Эффективен при уратных и оксалатных камнях. Противопоказан при фосфатных камнях, так как повышает рН мочи. Очень эффективен при хроническом простатите, цистите и уретрите. Иногда в сборах применяется при импотенции и аденоме простаты. Благодаря антифунгиальному действию, эффективен против кандидозов, а в просторечии - молочницы.
В народной медицине используют при желчнокаменной болезни, расстройствах желудка, при ревматизме, подагре, связанных с нарушением обмена мочевой кислоты. Наружно свежие листья используют при нарывах и фурункулах. В Германии иногда применяют при заболеваниях вен, что, вероятно, связано с высоким содержанием флавоноидов и ярко выраженным противовоспалительным, сосудоукрепляющим и антиоксидантным действием.
(Solidago canadensis L.) очень декоративен, выведены многочисленные садовые формы, которые заметно отличаются по высоте и форме соцветий. Этот вид - многолетнее травянистое растение высотой до 150 см, сильно напоминающее золотарник обыкновенный. Стебли прямостоячие, разветвляющиеся в верхней части, по всей длине густо облиственные, деревянистые у основания. Окраска стеблей от темно- до светло-зеленой. Листья очередные, линейно-ланцетные, на верхушке длинно-заостренные с хорошо заметными тремя жилками. Нижние листья по краям остропильчато-зубчатые, короткочерешковые, длиной 5-12 см. Верхние листья цельнокрайние, сидячие, в длину 4-8 см. Цветочные корзинки мелкие, диаметром 3-5 мм, состоят из 4-6 язычковых и 5-8 трубчатых цветков. Язычковые цветки желтого цвета, расположены в один ряд. Трубчатые находятся в центре корзинки, имеют 5 тычинок и пестик с плоским двураздельным рыльцем. Плод - узкоцилиндрическая ребристая семянка длиной 4-15 мм. Цветет со второго года жизни в конце июля-начале августа, плодоносит в конце августа-начале сентября.
Родина этого вида - Северная Америка. Встречается в США в горах до субальпийской зоны. В Европе сначала использовался как декоративное, после - и как лекарственное растение. Одичал и в настоящее время широко распространен по всем западным и центральным районам Европейской части страны.
Золотарник канадский - неприхотливое растение, нетребовательное к почвенным условиям. Переносит частичное затенение, но лучше развивается на солнечных участках. Растение очень крупное и мощное, исходя из этого следует выбирать просторное место для его посадки. Размещать растения можно в миксбордере и располагать с учетом высоты выбранного сорта или формы. В качестве сухоцвета срезанные в самом начале цветения верхние части побегов оживят своей яркой окраской любой зимний букет.
Выращивание и размножение
Выращивание растения не представляет трудностей. Золотарник легко размножается семенами и вегетативно, отрезками корневищ и зелеными черенками. Семена можно посеять без предварительной подготовки ранней весной. Потом растения лучше или проредить, или рассадить на расстоянии 20-30 см друг от друга. Осенью лучше срезать надземную часть на высоте 5-6 см от поверхности почвы.
Размножение вегетативное – отрезками корневищ, возможно - зеленым черенкованием. Черенки укореняются в условиях искусственного тумана, и даже без него, без особых сложностей. Оптимальная схема посадки 20-30х70 см.
Растение очень отзывчиво на минеральные и органические удобрения, которые, учитывая длительный срок произрастания на одном месте, имеет смысл внести при посадке.
Вредителями и болезнями растение практически не поражается.
Свойства и применение золотарника канадского
В качестве лекарственного сырья, так же, как у золотарника обыкновенного, применяется верхняя часть облиственных побегов, заготовленная в самом начале цветения. Срезают верхушки 30-40 см. Эксплуатировать плантацию можно 5 и более лет. Если запоздать с уборкой сырья, то соцветия сильно пушатся при сушке. В отличие от золотой розги, у золотарника канадскго после сушки удаляют грубые стебли, оставляя листья и соцветия. Сушат сырье в тени, раскладывая на чердаках или в сушилке при температуре не выше +35+40 о С.
Химический состав. Надземная часть растения содержит органические кислоты, дитерпеноиды, 2,4% сапонинов, фенольные соединения, фенолкарбоновые кислоты и их производные (кофейную, хлорогеновую, гидроксикоричную), до 0,12% флавоноидов (рутин, кверцетин и др.), кумарины, эфирное масло, аминокислоты, хлорофилл, сахара, липофильные вещества, дитерпены, большое количество тритерпеновых сапонинов. По нормативным документам, сумма флавоноидов в пересчете на рутин должна быть не менее 3%.
Фармакологическое действие. Растение обладает сильным мочегонным действием, применяется при заболеваниях почек и мочевого пузыря, особенно часто при мочекаменной болезни. Эффективен при уратных и оксалатных камнях. Противопоказан при фосфатных, так как повышает рН мочи. При этом, наряду с мочегонным действием, проявляет противовоспалительное и сильнейшее антибактериальное. Очень эффективен при хроническом простатите, цистите и уретрите. Иногда в сборах применяется при импотенции и аденоме простаты. Золотарник канадский входит в состав польского Фитолизина и украинского Марелина. В ВИЛАРе разработан комплексный препарат Простанорм, применяемый при острых и хронических простатитах и аденоме простаты, в который, кроме золотарника канадского, входят эхинацея и солодка.
В народной медицине используют при желчнокаменной болезни, расстройствах желудка, при ревматизме, подагре, связанных с нарушением обмена мочевой кислоты. Наружно свежие листья используют при нарывах и фурункулах. В Германии иногда применяют при заболеваниях вен.
В связи с некоторой токсичностью золотарника обыкновенного, необходимо соблюдать дозировку . Золотарник канадский практически не токсичен.
Настой травы : 20 г сырья на 200 мл кипятка настоять, процедить и принимать после еды по 1/3-1/4 стакана 3 раза в день.
Холодный настой травы : 6 чайных ложек сырья залить 400 мл кипяченой воды и настаивать 8 часов, процедить, выпить в течение дня.
Благодаря высокому содержанию флавоноидов, надземная часть обоих видов золотарника может быть использована для окраски ткани в жёлтый цвет (речь идёт о натуральных волокнах - шерсть, шёлк, и несколько хуже - хлопок).
В последние годы ученые обнаружили сильное аллелопатическое влияние золотарника на микрофлору почвы. Растения выделяют в почву большое количество вторичных метаболитов, которые подавляют развитие живущих в почве вредоносных фитопатогенов и очищают таким образом почву.
Были получены интересные результаты, что отвар двух видов растений - золотарника канадского (лист) и гвоздики подавляет развитие комаров рода Аедес (Аedes aegypti ), который является переносчиком возбудителей желтой лихорадки, лихорадки денге, вухерериоза. Так что изгнанием солей из организма польза золотарника не ограничивается.
Фото: Елена Маланкина, Максим Минин, Рита Бриллиантова
В конце лета на садовых участках можно заметить солнечное растение ярко-желтого цвета с мелкими цветочками, собранными в пирамидальную метелку. Это золотарник. И это не просто растение, а медонос и к тому же лекарство, которое спасает нас от многих заболеваний. В народе его еще называют «золотое перо», «золотая розга», живая трава, а в Белоруссии «сумник». Ареал распространения охватывает лесные зоны Западной части Сибири, Атлантической и Средней Европы, Кавказа, Скандинавии, Дальнего Востока.
Описание
Больше всего популярностью пользуются две разновидности: канадский золотарник (фото представлены ниже) и обыкновенный. Рассмотрим подробнее внешний вид каждого из них.
Золотарник обыкновенный
Это травянистое растение, многолетник, относящийся к семейству сложноцветных. В основном он предпочитает произрастать на полянах, в зарослях кустарников, на опушках, речных берегах, холмистых склонах. Во взрослом состоянии высота золотого пера достигает 0,8-1 м.
Корневая система поверхностная, мясистая. Имеется единичный прямостоячий стебель, иногда окрашенный в красноватый оттенок. Верхушка растения ветвится, хотя сам стебель практически не укрыт листвой. Последняя имеет очередное расположение, пильчатый край и острую и продолговато-эллиптическую форму. Что примечательно, по всей своей площади сумник имеет незначительную опушенность.
Растение ядовито!
В конце лета с июля по сентябрь верху стебля формируются соцветия кистевидной или метельчатой формы, включающие в себя большое число цветков ярко-желтого цвета. По окончании цветения, с августа по октябрь, образуется плод, содержащий ребристые цилиндрической формы семена с хохолком.
Золотарник канадский
Этот вид растения также относится к многолетним формам сложноцветных. Встречается в основном вдоль дорог, на полянах, болотах, опушках, речных и озерных берегах. Что касается почвы, то излюбленным местом являются умеренно влажные, но в то же время растение неплохо развивается и на слабовлажных и даже болотистых участках.
Корень короткий, стержневой. Стебель идентичен предыдущей разновидности золотарника, только окрашен в тона от светло- до темно-зеленого цвета, и высота растения достигает 1,4 м. Также имеется и слабая опушенность. На стебле поочередно расположены листья линейно-ланцетовидной формы, причем внизу они имеют пильчатые края и короткий черешок, а ближе к верхушке - сидячие и цельнокрайние.
Цветение наступает с распусканием ярко-желтых мелких (3-5 мм) обоеполых бутонов и дальнейшим формированием конусообразной метелки до 20 см. В середине метелки цветки трубчатой формы, а по краям ложноязычковые. По окончанию цветения формируются узкоцилиндрические плоды в виде ребристой семянки, с белым хохолком.
Золотарник гибридный
Существует и такая разновидность растения, но она мене популярна. Отличается компактны ми размерами и красивой листвой. Именно этот экземпляр дал жизнь другим сортам, таким, как голдтанне, спатголд, страхленкрон, перкео.
Золотарник: посадка и уход (с фото растения)
Для того чтобы растение радовало глаз своим ярким цветением, нужно правильно ухаживать за растением в период роста.
Для посадки лучше всего выбирать места, хорошо освещенные солнечными лучами. Но даже в легком затенении золотое перо будет прекрасно произрастать. Но вы должны знать, что это по-разному отражается на цветении: чем ярче освещение, тем оно раньше и обильнее. Стоит добавить, что растение прекрасно переносит морозы.
Предпочтительнее высаживать растение на плодородных суглинках, так цветение будет намного пышнее. Но можно совершать посадку и в тяжелые бедные почвы. Незначительная засуха – не проблема для сумника. Тем не менее для лучшего цветения следует поливать его регулярно.
В летнюю пору полив должен быть обильным.
За год золотарнику нужно дважды внести удобрение. С наступлением весны это удобрения комплексного состава с 10-20% содержанием А вот в осеннее время нужны подкормки препаратами с азотным содержанием не более 10% или вообще без его наличия.
В весеннее время, а также с начала лета у кустов нужно удалить слабые побеги. Это простимулирует рост новых, а также цветение. Перед зимой растение следует подготовить. Для этого полностью срезают всю земную часть.
На одном месте золотарник можно оставлять не более 10 лет. После середина кустов редеет и ее нужно будет обновить посадкой новых экземпляров.
Размножение
Увеличить численность экземпляров можно несколькими способами:
- Рассадкой кустов весной или летом.
- Черенками. Для этого летом отделяют пару молодых побегов, разделив корневую систему. Можно также обрезать верхушку от длинного однолетнего побега, а позже укоренить.
- Еще один способ - обрезать у куста побеги во время цветения. Это простимулирует спящие почки и дать рост новым росткам.
- Семенной. Собранный посадочный материал высеивают в грунт при 18–22°C. Спустя 2-3 недели можно наблюдать первые всходы. Стоит отметить, что семена, благодаря своим хохолкам, разлетаются вокруг и дают новый рост, постепенно превращаясь в заросли. Чтобы этого избежать, молодую поросль нужно удалять, а метелки после цветения обрезать, чтобы не дать семенам созреть.
Болезни и вредители
В жару растение из-за сильной загущенности кустов довольно часто поражается мучнистой росой. Чтобы это не допустить, кусты стоит регулярно прореживать, удаляя треть ростков. Не стоит усердствовать и в добавлении азотистых удобрений. Их излишек также провоцирует появления заболевания.
Что примечательно, вредителями золотарник не поражается.
Благодаря своей яркости золотая розга широко используется как , в групповых и солитерных посадках, для миксбордеров, рабаток, в качестве украшения оград бордюров. Сорта с низкой высотой отлично смотрятся в альпинариях контейнерах на террасах или балконах.
Лечебные свойства и противопоказания золотарника
В медицине отдают предпочтение именно канадскому или обыкновенному сумнику. Рассмотрим лекарственное воздействие каждого.
Лечебные свойства обыкновенного золотарника
Для лечения используют надземные части растения, в частности листву и метелки. Корневая система также применяется, но гораздо реже. Для заготовки наземной части берутся летом в период цветения, подземной - осенью.
Растение и все приготовленные из него целебные настои, отвары и другие средства обладают:
- Антибактериальным и антиоксидантным действием.
- Благодаря наличию флавоноидов уменьшается капиллярная проницаемость.
- В некоторых случаях его включают в сборы, рекомендованные для лечения аденомы простаты и импотенции.
- Отмечена эффективность при камнях оксалатной и уратной природы.
- Мочегонным действием, поэтому эффективно используются при проблемах с мочевым пузырем и почками.
- Противовоспалительными и сосудоукрепляющими свойствами.
- Успешно используется в лечении цистита, простатита хронической формы, уретрита.
- Антифунгиальными свойствами, что дает возможность лечить молочницу.
Золотарник противопоказано использовать при фосфатных камнях, поскольку он имеет способность увеличивать рН мочи.
Также обыкновенный сумник используют и в народной медицине, например, при расстройствах желудка, подагре, ревматизме, в лечении фурункулов. В последнем случае в качестве лечебного средства являются листья растения, если их приложить к больному месту.
Лечебные свойства канадского золотарника
В этом сорте также используется надземная часть, которая заготавливается, как только распустятся цветы.
Сбор лекарственного сырья осуществляется в период цветения (на начальной стадии). Для этого с побегов срезают верхние 30-40 см. Дальнейшая подготовка отличается от обычного золотого пера. Со срезанных верхушек удаляют стебли и сушке подвергают только метелки и листья. Далее их отправляют в тень сушиться при температуре не более 35-40ºС, расположив тонким слоем на подложке.
Не затягивайте сбор материала, иначе при сушке цветы будут сильно пушиться.
Из подготовленного сырья готовят лечебные средства, которые используют для тех же заболеваний, что и обычный сумник. В этот список включается еще и борьба с коклюшем, энурезом, бронхиальной астмой, разнообразными проблемами кожных покровов.
Теперь вы ознакомлены с полезными свойствами золотарника, противопоказаниями и уходом за ним. При соблюдении всех рекомендаций вы сможете красиво обустроить своего участка, сделав его живым и ярко-желтым, а также сможет поправить свое здоровье. Правда, не забудьте предварительно проконсультироваться у лечащего врача.
Осенний медонос золотарник - видео
«Фармакогностическое изучение золотарника кавказского (Solidago caucasica Kem.–Nath.) ...»
-- [ Страница 1 ] --
Пятигорский медико-фармацевтический институт –
филиал государственного бюджетного образовательного учреждения высшего
профессионального образования «Волгоградский государственный
медицинский университет» Министерства здравоохранения
Российской Федерации
На правах рукописи
ФЕДОТОВА ВИКТОРИЯ ВЛАДИМИРОВНА
Фармакогностическое изучение
золотарника кавказского (Solidago caucasica Kem.–Nath.)
14.04.02 – фармацевтическая химия, фармакогнозия
ДИССЕРТАЦИЯ
на соискание ученой степени кандидата фармацевтических наукНАУЧНЫЙ РУКОВОДИТЕЛЬ
КОНОВАЛОВ Д.А.ДОКТОР ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИХ НАУК,
ПРОФЕССОР
ПЯТИГОРСК – 201 СПИСОК СОКРАЩЕНИЙВВЕДЕНИЕ
ГЛАВА 1 ФАРМАКОГНОСТИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ВИДОВ РОДА
ЗОЛОТАРНИК1.1 История и распространение видов рода Золотарник
1.3 Систематическое положение рода Золотарник
1.4 Химический состав изученных видов рода Золотарник
1.5 Использование сырья видов рода Золотарник
Выводы по обзору литературы
2.1 Объекты исследования
2.2 Методы исследования
2.2.1 Химические реакции
2.2.2 Хроматографические методы исследования
2.2.3 Спектральные методы
2.2.4 Титриметрические методы
2.2.5 Гравиметрические методы
2.2.6 Ресурсоведческие исследования
2.2.7 Фармакологические методы исследования
2.2.8 Отбор проб для анализа
2.2.9 Методы макро– и микроскопического анализа сырья
2.2.10 Определение числовых показателей
2.2.11 Валидация методики количественного определения
2.2.12 Микробиологическая чистота
2.2.13 Определение сроков годности
2.2.14 Методы статистической обработки
ГЛАВА 3 ПРЕДВАРИТЕЛЬНЫЕ РЕСУРСОВЕДЧЕСКИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
ЗОЛОТАРНИКА КАВКАЗСКОГО И ИЗУЧЕНИЕ ВОЗМОЖНОСТЕЙ
ВВЕДЕНИЯ ЕГО В КУЛЬТУРУ3.1 Определение урожайности травы золотарника кавказского
3.2 Расчет объема ежегодных заготовок
3.3 Исследования по введению золотарника кавказского в культуру................. 41 Выводы по главе
ГЛАВА 4 МОРФОЛОГИЧЕСКОЕ И АНАТОМО–ДИАГНОСТИЧЕСКОЕ
ИЗУЧЕНИЕ ТРАВЫ И КОРНЕВИЩ С КОРНЯМИ ЗОЛОТАРНИКА
КАВКАЗСКОГО4.1 Морфологическая характеристика «Золотарника кавказского травы»......... 46
4.2 Анатомическое строение листа
4.2.1 Строение листа с поверхности
4.2.2 Строение листа на поперечном срезе
4.3 Анатомическое строение стебля
4.3.1 Строение стебля с поверхности
4.3.2 Строение стебля на поперечном срезе
4.3.3 Строение стебля на продольном срезе
4.4 Анатомическое строение цветка
4.5 Микроскопический анализ измельченной «Золотарника кавказского травы»
4.6 Микроскопический анализ порошка «Золотарника кавказского травы»...... 66
4.7 Морфологическая характеристика корневищ с корнями золотарника кавказского
4.8 Анатомическое строение корневищ с корнями золотарника кавказского.... 69 Выводы по главе
ГЛАВА 5 ФИТОХИМИЧЕСКОЕ ИЗУЧЕНИЕ ТРАВЫ И КОРНЕВИЩ С
КОРНЯМИ ЗОЛОТАРНИКА КАВКАЗСКОГО. РАЗРАБОТКА НОРМ
КАЧЕСТВА ЗОЛОТАРНИКА КАВКАЗСКОГО ТРАВЫ5.1 Анализ травы и корневищ с корнями золотарника кавказского с помощью качественных реакций
5.2 Изучение фенольных соединений травы золотарника кавказского методом БХ
5.3 Обнаружение рутина методом ТСХ в «Золотарника кавказского траве»..... 78
5.4 Изучение фенольных соединений золотарника кавказского травы методом ВЭЖХ
5.5 Количественное определение флавоноидов в пересчете на рутин в «Золотарника кавказского траве» методом дифференциальной спектрофотометрии
5.6 Количественное определение фенолкарбоновых кислот в траве и корневищах с корнями золотарника кавказского методом спектрофотомерии в пересчете на кофейную кислоту
5.7 Количественное определение дубильных веществ в траве и корневищах с корнями золотарника кавказского
5.8 Изучение тритерпеновых гликозидов травы золотарника кавказского........ 95
5.9 Изучение полиацетиленовых соединений корневищ с корнями золотарника кавказского
5.10 Количественное определение органических кислот в траве золотарника кавказского
5.11 Изучение органических кислот травы золотарника кавказского методом ВЭЖХ
5.12 Изучение углеводов травы золотарника кавказского
5.13 Биологически активные соединения травы золотарника кавказского, идентифицированные методом ГЖХ–МС
5.14 Изучение аминокислотного состава травы золотарника кавказского....... 1
5.15 Изучение минерального состава травы золотарника кавказского............. 1
5.16 Определение некоторых числовых показателей травы и корневищ с корнями золотарника кавказского
5.17 Микробиологическая чистота «Золотарника кавказского травы»............ 1
5.18 Установление срока годности «Золотарника кавказского травы»............ 1 Выводы по главе
ГЛАВА 6 ПРЕДВАРИТЕЛЬНЫЕ ТЕХНОЛОГИЧЕСКИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
ПО РАЗРАБОТКЕ «ЗОЛОТАРНИКА КАВКАЗСКОГО ТРАВЫ ЭКСТРАКТА
СУХОГО», СТАНДАРТИЗАЦИЯ ПОЛУЧЕННОГО ЭКСТРАКТА И
ПРЕДВАРИТЕЛЬНОЕ ИЗУЧЕНИЕ ЕГО ФАРМАКОЛОГИЧЕСКОЙ
АКТИВНОСТИ6.1 Получение «Золотарника кавказского травы экстракта сухого»................. 1
6.2 Разработка методик стандартизации «Золотарника кавказского травы экстракта сухого»
6.2.1 Общие показатели
6.2.2 Изучение фенольных соединений
6.2.3 Количественное определение суммы флавоноидов в пересчете на рутин методом дифференциальной спектрофотометрии
6.2.4 Количественное определение фенолкарбоновых кислот в пересчете на кофейную кислоту методом спектрофометрии
6.3 Установление срока годности «Золотарника кавказского травы экстракта сухого»
6.4 Предварительное изучение фармакологической активности
6.4.1 Определение «острой» токсичности «Золотарника кавказского травы». 133 6.4.2 Патоморфологические изменения в органах, вызванные введением извлечения из травы золотарника кавказского в дозе 10000 мг/кг
6.4.3 Изучение диуретической активности «Золотарника кавказского травы экстракта сухого»
6.4.4 Изучение антибактериального действия «Золотарника кавказского травы экстракта сухого»
Выводы по главе
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
БАС – биологически активные соединения БХ – бумажная хроматография ВРПС – водорастворимые полисахариды ВЭЖХ – высокоэффективная жидкостная хроматография ГЖХ – газо-жидкостная хроматография ГЖХ-МС – газожидкостная хромато-масс-спектрометрия ГМЦ – гемицеллюлозы ЛД – летальная доза ЛРС – лекарственное растительное сырье ПВ – пектиновые вещества ПС – полисахариды СО – стандартный образец СРС – спирторастворимые сахара ТСХ – хроматография в тонком слое сорбента ФСП – фармакопейная статья предприятия Ara – арабиноза Gal – галактоза Glс – глюкоза Rha – рамноза UAc – уроновые кислоты Xyl – ксилоза
ВВЕДЕНИЕ
Актуальность темы исследования Заболевания мочеполовой сферы в мире по данным Всемирной организации здравоохранения находятся на одном из лидирующих мест в общей структуре заболеваемости населения. На сегодняшний день среди мужчин старше 60 лет в 90% случаях диагностируются заболеваниями почек, мочевого пузыря и предстательной железы. У женщин старше 50 лет уролитиаз, цистит и т.п. отмечается в 70% случаев . Синтетические препараты успешно используются в качестве основных средств при фармакотерапии и профилактике заболеваний почек. Но, несмотря на высокую эффективность, они оказывают и неблагоприятное воздействие на функциональное состояние организма. Биологически активные соединения лекарственных растений обладают широким спектром действия, низкой токсичностью, что позволяет их рекомендовать для длительной терапии. Однако, выбор растительных лекарственных препаратов, оказывающих комплексное нефропротекторное воздействие, ограничен.Перспективным источником с точки зрения получения нового вида лекарственного растительного сырья (ЛРС) является ранее неизученный представитель флоры Кавказа – золотарник кавказский (Solidago caucasica Kem.-Nath.).
Лекарственные средства на основе некоторых видов рода золотарник широко используются в мировой медицинской практике. Так, экстракт травы золотарника канадского входит в препарат «Марелин» (Украина), применяемый в качестве спазмолитического, диуретического и противовоспалительного средства при лечении и профилактике оксалатного и уратного уролитиаза, а также в состав препарата «Простанорм» (Россия), рекомендуемого при простатите. Экстракт травы золотарника обыкновенного входит в состав препарата «Фитодолор» (Германия), противовоспалительная активность которого сопоставима с таковой индометацина. Подземная часть этого вида золотарника входит в состав БАД «Мен"с формула Простата форте», а также используется в народной медицине Кавказа в качестве ранозаживляющего средства .
В связи с этим изучение золотарника кавказского мы посчитали целесообразным.
Степень разработанности темы Золотарник кавказский является неизученным научной медициной представителем флоры Северного Кавказа.
Цель и задачи исследования Целью работы являлось фармакогностическое изучение золотарника кавказского и научное обоснование возможности использования его в качестве источника сырья для получения лекарственных средств, оказывающих влияние на мочевыделительную систему. Для достижения этой цели необходимо было решить следующие задачи:
Изучить данные научной литературы по распространению, фитохимическому и фармакологическому изучению представителей рода Solidago.
Оценить ресурсные характеристики золотарника кавказского в некоторых районах Северного Кавказа и исследовать возможность его культивирования.
Определить морфолого-анатомические признаки травы и корневищ 3.
с корнями золотарника кавказского.
Исследовать качественный состав и количественное содержание основных групп биологически активных соединений (БАС) травы и корневищ с корнями золотарника кавказского.
Провести предварительное изучение «острой» токсичности, диуретической и антибактериальной активности травы и сухого экстракта золотарника кавказского.
Разработать проект фармакопейной статьи предприятия на «Золотарника кавказского траву».
Научная новизна
В результате проведенных исследований нами впервые:
определены ресурсы золотарника кавказского в отдельных районах его произрастания на Северном Кавказе и изучена возможность его культивирования;
предложены морфологические и анатомо–диагностические признаки, позволяющие установить подлинность травы и корневищ с корнями золотарника кавказского;
методом ВЭЖХ установлено, что в траве золотарника кавказского содержатся 24 фенольных соединения, из которых идентифицированы флавоноиды (рутин, виценин, гесперидин), кумарины (умбеллиферон, эскулетин, дигидрокумарин), фенолкарбоновые кислоты (галловая, цикориевая, хлорогеновая и кофейная);
в составе органических кислот в траве золотарника кавказского методом ВЭЖХ идентифицированы лимонная, яблочная и янтарная;
изучены углеводы травы золотарника кавказского, основными по содержанию являются фракции пектиновых веществ (ПВ) и гемицеллюлоз (ГМЦ);
установлено, что трава золотарника кавказского содержит тритерпеновые гликозиды – производные олеаноловой кислоты;
методом ГЖХ–МС в траве золотарника кавказского обнаружены жирные кислоты (дигидроксипропионовая, тригидроксимасляная, гидроксимасляная, пальмитиновая, линолевая, линоленовая, стеариновая кислоты), многоатомные спирты и их производные (глицерин, ксилит, рибит, инозит, мио–инозит, сцило–инозит, глюцитол) и др.;
методом жидкостной хроматографии на автоматическом аминокислотном анализаторе в траве золотарника кавказского впервые обнаружены 15 аминокислот, из которых 9 являются незаменимыми;
установлено, что трава золотарника кавказского содержит 5 макроэлементов и 16 микроэлементов. Из них эссенциальными являются 11 элементов, условно–эссенциальными – 6 и условно–токсичными – 4 элемента;
установлено количественное содержание суммы флавоноидов, фенолкарбоновых кислот, органических кислот, тритерпеновых гликозидов, дубильных веществ в траве и фенолкарбоновых кислот и дубильных веществ в корневищах с корнями золотарника кавказского;
методом ВЭЖХ в сухом экстракте золотарника кавказского установлено содержание 18 соединений, из которых идентифицированы рутин, лютеолин–7–гликозид, умбеллиферон, виценин, эскулетин, гесперидин, галловая, цикориевая, хлорогеновая и кофейная кислоты;
в сухом экстракте золотарника кавказского методом ВЭЖХ выявлено наличие лимонной, яблочной и янтарной кислот, среди которых по содержанию преобладает лимонная кислота;
установлено содержание суммы флавоноидов и фенолкарбоновых кислот в сухом экстракте золотарника кавказского;
изучена токсичность «Золотарника кавказского травы», определена диуретическая и антимикробная активность, полученного из нее экстракта.
Теоретическая и практическая значимость работы Изучена возможность использования нового вида отечественного сырья – «Золотарника кавказского травы» для получения суммарного препарата («Золотарника кавказского травы экстракта сухого»), обладающего диуретической и антимикробной активностью.
Разработаны методы качественного и количественного анализа травы золотарника кавказского, основанные на обнаружении фенольных соединений, тритерпеновых гликозидов, органических кислот и полисахаридов. Разработана технологическая схема производства сухого экстракта травы золотарника кавказского. Разработаны нормы, позволяющие стандартизовать траву золотарника кавказского и сухой экстракт из нее с учетом современных требований, предъявляемых к качеству ЛРС и извлечений на его основе.
Методология и методы исследования В работе были использованы методы позволившие провести комплексные фармакогностические (макро– и микроскопические, фитохимические, товароведческие и ресурсоведческие) исследования. В рамках отдельных технологических и фармакологических экспериментов с использованием соответствующих методов исследования были получены предварительные данные, позволившие обосновать возможные направления использования нового вида ЛРС. Фитохимические исследования проводились с использованием бумажной, тонкослойной, газожидкостной хроматографии, высокоэффективной жидкостной хроматографии, газожидостной хромато–масс–спектрометрии, спектрофотометрии в УФ–, видимой и ИК– областях.
Положения, выносимые на защиту :
результаты ресурсоведческих и интродукционных исследований золотарника кавказского;
результаты морфолого-анатомического изучения травы и корневищ с корями золотарника кавказского;
результаты фитохимического изучения основных групп БАС в траве и корневищах с корнями золотарника кавказского;
методики стандартизации «Золотарника кавказского травы» и сухого экстракта на ее основе;
результаты предварительных фармакологических исследований.
Степень достоверности и апробация результатов. Достоверность полученных результатов определяется объемностью изученной информационной базы и обширностью исследования, использованием различных современных физико–химических методов анализа, математико–статистической обработкой полученных данных.
Основные положения диссертационной работы представлены на Международной научной конференции «Рациональное использование природных биологических ресурсов» (Рим–Флоренция, 2013); на II Международной научно– практической конференции «Кластерные подходы фармацевтического союза:
образование, наука и бизнес» (Белгород, 2012); на XХ Российском национальном конгрессе «Человек и лекарство» (Москва, 2013); на региональных конференциях «Разработка, исследование и маркетинг новой фармацевтической продукции» (Пятигорск, 2012, 2013, 2014); на научно-практической конференции молодых ученых и студентов ВолгГМУ "Актуальные проблемы экспериментальной и клинической медицины" (Пятигорск, 2014); на региональном подготовительном этапе Конкурса молодежных проектов Всекавказского молодежного Форума «Машук–2013» (Пятигорск, 2013); на Северо–Кавказском молодежном Форуме «Машук–2013» (Пятигорск, 2013). По материалам диссертации опубликовано 16 работ, в том числе 7 статей – в журналах, рекомендованных ВАК РФ.
Личный вклад автора Автор участвовал во всех этапах экспериментальных работ, в получении исходных данных, их обработке и интерпретации, оформлении диссертационной работы. Автором проведен фитохимический анализ травы и корневищ с корнями золотарника кавказского, исследованы ресурсы травы и изучена возможность введения в культуру золотарника кавказского, установлены морфологические и анатомо-диагностические признаки сырья, проведены предварительные фармакологические исследования экстракта из травы золотарника кавказского.
Объем и структура диссертации
Работа изложена на 163 страницах текста компьютерного набора и состоит из введения, обзора литературы, описания объектов и методов исследования, 4 глав собственных исследований, заключения, списка цитируемой литературы, включающего 163 источника, из которых 86 на иностранном языке, и приложения. Диссертация иллюстрирована 53 рисунками и 35 таблицами.
ГЛАВА 1 ФАРМАКОГНОСТИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ВИДОВ
РОДА ЗОЛОТАРНИК
1.1 История и распространение видов рода Золотарник Золотарник (Solidago L.) известен еще с библейских времен, по одной из версий он является жезлом Аарона. Когда израильтяне возроптали на первосвященника Аарона, Моисей, по повелению Божию, приказал начальникам колен принести свои жезлы. На них Моисей написал имена тех, кому они принадлежали. Все жезлы были положены в скинии собрания перед ковчегом. Оказалось, что только жезл Аарона чудесным образом расцвел за одну ночь, знаменуя этим избранность сословия священников (Библия, чис. 9:4).
Русское название золотарник происходит от слова золото. Оно дано по золотисто–желтым цветкам растения. Название золотая розга дано по форме стебля и цветка. Стебель у этого растения прямой, желобчатый и похож на хлыст.
Родовое название Solidago L. происходит от латинского solidus – крепкий, здоровый и agree – делающий. Французское название Verge d’or происходит от двух слов verge – розга (хлыст) и or – золото. Английское название Goldenrod имеет следующее происхождение: golden – золото и rod – розга.
В словаре Н.И. Анненкова для золотарника обыкновенного (Solidago virgaurea L.) приводится более 50 синонимов, благодаря тому, что он в каждой российской губернии имел свое толкование и название: блошник, полетуха (Могил.), винокур (Нижег.), воронец, заячьи уши (Костр.), зверобой (Моск.), желтый цвет, золотое перо (Тверск.), живительная трава (Перм.), краснуха (Пск.), боровой пуховик (Влад.), перестрел, табака лесная (Гродн.), дикая цыкорiя (Минск.), жовтобрюх (Киев.), nawloc glowienki czerwone (Пол.), woolmete rohi (Эст.), keltainenkukka (Фин.) .
В Канаде, США и Мексике золотарник широко распространен как дикорастущее растение, в Европе – как возделываемое декоративное и одичалое .
Впервые как декоративное интродуцированное растение золотарник зарегистрирован в Ботаническом саду Лондона в 1758 г. . Вскоре он был отмечен в садах и питомниках континентальной Европы . Золотарник стал инвазионным через 100 лет ввиду высокого уровня изменчивости морфолгических признаков . В настоящее время ареал рода в Европе простирается от 42 до 63° с. ш. и ожидается дальнейшее расширение его границ в восточном направлении .
Помимо Европы золотарник также натурализовался в Японии, Корее и на Дальнем Востоке РФ , в Новой Зеландии, Австралии, на Азорских и на Гавайских островах, а также в Мексике .
В СССР золотарник канадский был впервые введен в культуру в 1986 году на Украине c целью получения лекарственного растительного сырья для производства препарата Марелин. После распада СССР культура золотарника канадского была апробирована в России в условиях Ставропольской возвышенности , нечерноземной зоне и Московской области .
Распространение видов рода Золотарник во флоре России и сопредельных государств (в пределах бывшего СССР) по данным Черепанова С.К. представлено в таблице 1.1.
Золотарник требователен к свету , однако обнаруживается и в тени . Чаще встречается на участках богатых азотом, предпочитает климат с умеренными летними и зимними температурами , обладает широкой устойчивостью к влажности почвы .
Виды рода Золотарник являются корневищными гемикриптофитами и имеют сложный жизненный цикл с поколениями корневищ и семян. Образование семян, новых побегов и корневищ происходит каждый год, а все надземные побеги отмирают в осенний период . В менее благоприятных условиях и под воздействием часто повторяющихся повреждающих факторов образуется больше легких семян, что гарантирует рассеивание на дальние расстояния .
–  –  –
Таким образом, во флоре России и сопредельных государств (в пределах бывшего СССР) встречаются 26 видов рода Золотарник.
1.2 Ботаническая характеристика видов рода Золотарник
–  –  –
Золотарник кавказский (Solidago caucasica Kem.–Nath.) – многолетнее травянистое растение со стеблями, немного приподнимающимися при основании или прямостоячими, высотой 30-70 см, у основания слегка или полностью окрашены антоцианом в красный цвет.
Листья яйцевидно–продолговатые, продолговато–ланцетные или ланцетные, пильчатые, суженые в окрыленный черешок, короче листовой пластинки.
Самые верхние листья нередко сидячие.
Соцветие колосовидное, сжатое, плотное или рыхловатое, обычно прерванное. Ножки цветочных корзинок без прицветников или с немногочисленными прицветниками, чаще сильно опушенные.
Корзинки крупные, высотой 1-1,5 см, 1,5-2 см в диаметре. Обвертка конически–колокольчатая. Листочки корзинки рыхло расположенные, немногорядные, наружные ланцетные в 1,5-2 раза короче узколинейных внутренних, те и другие слегка опушенные, острые. Язычки краевых цветков узкопродолговатые, равные по длине обвертке или слегка короче ее. Цветки мелкие желтые, плод семянка .
Отличительными морфологическими признаками являются 2-, 3-рядная обвертка, корзинки 15-20 мм шириной, ножки корзинок обычно без прицветников .
–  –  –
1.4 Химический состав изученных видов рода Золотарник S. virgaurea L. – з. обыкновенный
Полифенолы:
Флавоноиды: рутин, кверцетин, кверцитрин, астрагалин , изокверцитрин, рамноглюкозид кемпферола , кемпферол, изорамнетин, нарциссин, глюкорамнозид рамнетина , никотифлорин, афзелин (3–рамнозид кемпферола) , кверцетин–D–глюкозид, кемпферол–D–глюкозид, кемпферол–3–О–рутинозид Фенолкарбоновые кислоты: хлорогеновая , кофейная, изохлорогеновая гидроксикоричная, хинная Фенольные соединения: лейокарпозид , виргауреозид А Кумарины: эскулетин, эскулин Дубильные вещества Антоцианы: 3–гентиобиозид цианидина Сапонины: виргауреасапонины (виргауреасапонин–3 ), в гидролизате виргауреагенин А , виргауреагенин В (олеаноловая кислота), виргауреагенины С, D, Е, виргауреагенины G (полигаловая кислота), Н , солидагосапонин 21 – 30 (рисунок 1.
2) , байогенин Дитерпеноиды Тритерпеноиды Полиацетиленовые соединения: 2,8–цис–цис–матрикариаэфир, матрикариа–лактон, лахнофиллумлактон Бром 0,055% Углеводы: полисахариды 3-8%, в гидролизате галактуроновая кислота, галактоза, глюкоза, арабиноза, ксилоза, рамноза Фитоэкдизоны Жирное масло 14,4% Каучук Компоненты эфирного масла: лимонен, –элемен, –элемен, гермакрен В, гермакрен D, –кадиен, –пинен, –мирцен Солидагосапонин 21 R1=Xyl; R2=H; R3=H; R4=A Солидагосапонин 26 R1=Glc; R2=H; R3=H; R4=A Солидагосапонин 22 R1=Xyl; R2=H; R3=A; R4=H Солидагосапонин 27 R1=H; R2= Glc; R3=H; R4=H Солидагосапонин 23 R1=Xyl; R2=H; R3=Api–Ac; R4=A Солидагосапонин 28 R1=Glc; R2=H; R3= Api; R4=Ac Солидагосапонин 24 R1=Xyl; R2=H; R3=H; R4=B Солидагосапонин 29 R1=H; R2= Glc; R3= Api; R4=Ac Солидагосапонин 25 R1=Xyl; R2=H; R3=H; R4=H Солидагосапонин 30 R1=Glc; R2=H; R3=H; R4=H
Рисунок 1.2 – Солидагосапонины
Solidago canadensis L. – золотарник канадский
Полифенолы:
Флавоноиды: кемпферол, кверцетин, изорамнетин, астрагалин, кемпферол–3–О–глюкорамнозид, кверцетин–3–О–глюкопиранозид, рутин, кверцетин– 3–О–(611–О–ацетил)–глюкопиранозид, изорамнетин–3–О–глюкопиранозид, изорамнетин–3–О–рутинозид (нарциссин), рамнетин–3–О–глюкорамнозид, изорамнетин–3–О–(611–О–ацетил)–глюкопиранозид Фенолкарбоновые кислоты: кофейная кислота Кумарины: скополетин, умбеллиферон Тритерпеновые сапонины: гликозиды олеаноловой кислоты, канаденсисапонины 1 – 8, 3–(3R–ацетоксигексадеканоилокси)–люп–20(29)–ен, 3–(3– кетогексадеканоилокси)–люп–20(29)– ен, 3–(3R–ацетоксигекса-деканоилокси)–29–нор–люпан–20–он,3–(3–гетогексадеканоилокси)– 29– нор–люпан– 20–он , байогенинсапонины 1 – 4 Компоненты эфирного масла: лимонен, –элемен,–элемен, гермакрен В, гермакрен D , –пинен, –мирцен , 3–эпи––кубебен, 3–эпи–– кубебен Полиацетиленовые соединения: матрикариаэфир, клеродан, колавеноловая кислота Аминокислоты, горечи, полисахариды S. gigantea Ait. – з. гигантский
Полифенолы:
Флавоноиды: кемпферол–3–О–рутинозид, кемпферол Фенолкарбоновые кислоты: хлорогеновая Компоненты эфирного масла: –пинен, –мирцен , эпи–ториленол, 1,10–секо–эудесма–4(15), 5(10)–диен–1–aл, цис–эудесм–4(10)– ен–1–oн Сапонины: гигантеасапонины 1 – 6 S. virgaurea var. gigantean
Полифенолы:
Флавоноиды: кемпферол–3–О–рутинозид Тритерпеноиды: эритродиол–3–ацетат , –амирина ацетат Витамины: –токоферол–квинон Производное изопрена: транс–фитол Компоненты эфирного масла: –диктиоптерол
–  –  –
S. decurrens Lour. – з. низбегающий
Полифенолы:
Фенолкарбоновые кислоты: кофейная, хлорогеновая Фенольные соединения: лейокарпозид Ароматические соединения: 5–бензилметоксибензоат, 3–метокси–4– ацетоксициннамоилангелат, 3,5–диметокси–4–ацетосициннамоилангелат, 2– метоксибензил–2,3,6–триметоксибензоат, 2–метоксибензил–2,6– диметоксибензоат, бензил–2–гидрокси–6–метоксибензоат, метил (2E,8Z)– декадиен–4,6–диноат, бензил–2,6–диметоксибензоат, метил (2Z,8Z)–декадиен– 4,6–диноат Антоцианы: цианидин–3–глюкозил–гликозид Стероиды: ситостерин Тритерпеновые сапонины: Полиацетиленовые соединения
–  –  –
S. rugosa Mill. – з. морщинистый Дитерпеноиды: (+)–18–тиглоксиманнол, 18–гидроябиета–7,13(14)–диен, 18–тиглоксиябиета–7,13(14)–диен, 7–гидро–13,15–дигидроксиябиета–8 (14)– ен–18–оик кислота, 15–гидройдегидроабиетик кислота S. altissima L. – з. высочайший
Полифенолы:
Флавоноиды: кемпферол–3–O–рутинозид–7–O––D–апиофуранозид Фенолкарбоновые кислоты: хлорогеновая кислота, кофейная кислота и ее производные) Фенольные гликозиды: транс–тилирозид Ацетиленовые соединения и терпеноиды: дегидроматрикариалактон, Е,7–ацетоксилколавеновая кислота (солидагоновая кислота), колавенол .
1.5 Использование сырья видов рода Золотарник
Применение золотарника в народной медицине В народной медицине настой и отвар травы золотарника обыкновенного используется как диуретическое, антисептическое, противовоспалительное средство при болезнях почек и мочевого пузыря (мочекаменная болезнь, холецистит, язвенный цистит, энурез), гипертрофии предстательной железы. Однако, сфера применения золотарника намного шире. Он оказывает вяжущее, потогонное, отхаркивающее, гемостатическое действие, применяется при желчнокаменной болезни, сахарном диабете, бронхиальной астме, туберкулезе легких, острых респираторных инфекциях, остром ларингите, ангине, коклюше, подагре, артритах, энтерите, колите, меноррагии, белях, экземе, асците. В Молдавии, Белоруссии соцветия используют наружно в смеси со сливками, свиным жиром или сливочным маслом при туберкулезе кожи, дерматитах, ожогах, ревматизме.
В Коми АССР, на Кавказе, в Сибири – при скрофулезе. В китайской народной медицине семена золотарника обыкновенного применяют для разжижения крови и устранения вздутия кишечника, а также при нарушениях менструального цикла, холере, диарее, появлении крови в моче у детей. На Кавказе настойки подземной части золотарника применяются в качестве ранозаживляющего средства .
Применение золотарника в научной медицине Золотарник обыкновенный, з. канадский и з. гигантский включены в Европейскую фармакопею , з. канадский и з. гигантский – в Британскую травяную фармакопею . В СССР была разработана ФС «Трава золотарника канадского» .
Для видов рода Золотарник установлен целый спектр фармакологической активности.
Мочегонная активность Флавоноидная фракция золотарника обыкновенного в дозе 25 мг/кг показывала увеличение диуреза у крыс на 88% через 24 ч по сравнению с контрольным образцом (NaCl, 5 мл, пероральное введение), при этом наблюдалось снижение ночной экскреции калия и натрия и увеличение экскреции кальция.
Значительное увеличение диуреза у крыс с повышенным выведением натрия, калия и хлорид–ионов наблюдалось после приема внутрь золотарника обыкновенного (0,3% флавоноидов, 4,64 мл / кг и 10,0 мл / кг). Причем низкая доза оказалась более эффективной .
Противовоспалительная активность Противовоспалительная активность сапонинов золотарника обыкновенного была испытана на модели отека у крыс. В результате наблюдалось значительное снижение отека после внутривенного введения 1,25-2,5 мг/кг комплекса тритерпеновых сапонинов .
Лабдановые дитерпены, выделенные из золотарника чилийского, при хлоровородно–этанольно индуцированных поражениях желудка у мышей проявили гастропротектиновую активность .
Дитерпен солидагогенон, содержащийся в водном экстракте из соцветий золотарника чилийского, также проявил гастропротективную активность .
На крысах был протестирован препарат Phytodolor на противовоспалительную, обезболивающую и жаропонижающую активность. Активность была такой же, как и у стандартных образцов салицилового спирта и индометацина .
Сапонины, флавоноиды и кофейная кислота, выделенные из золотарника обыкновенного ингибировали активность лейкоцитарной эластазы и протеазы, участвующих в прогрессировании воспаления. Сапонины стимулировали синтез и высвобождение глюкокортикоидов в надпочечниках .
Водный экстракт золотарника обыкновенного значительно подавлял воспалительную реакцию на коже морских свинок, индуцированную рентгеновским излучением .
46% водно–спиртовый экстракт золотарника чилийского оказывал противовоспалительную активность за счет ингибирования дигидрофолат редуктазы.
Лейокарпозид, выделенный из золотарника чилийского, оказывал противовоспалительный и болеутоляющий эффект .
Выделенная из золотарника гигантского 3,5–ди–О–кофейная кислота обладала противовоспалительными свойствами, не имея побочных эффектов, и поэтому исследовалась как потенциальное лекарственное средство .
Антиоксидантная активность Водно–спиртовый экстракт золотарника обыкновенного как компонент препарата Phytodolor ингибировал образование активных форм кислорода .
Анальгетическая активность Экстракт золотарника обыкновенного проявлял анальгетическую активность, воздействуя на брадикининовые рецепторы .
Установлена эффективность жидкого экстракта золотарника чилийского при лечении люмбаго: в течение 15 дней кожу смазывали гелем, содержащим 5% экстракта золотарника чилийского, и добились значительного анальгетического эффекта .
Спазмолитическая активность Наличие флавоноидов (кверцетин и кемпферол) в золотарнике обыкновенном обуславливало установленное вазодилаторное действие, зависящее от ингибирования протеинкиназы С, ингибирования фосфодиэстеразы и циклических нуклеотидов, а также уменьшения поступления ионов Ca 2 + .
Антибактериальная активность
Эфирное масло золотарника обыкновенного и з. канадского оказывало антибактериальную активность в отношении Streptococcus faecalis, Staphylococcus aureus, Salmonella typhi, Bacillus subtilis, Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa . Сухие и жидкие водно–спиртовые экстракты золотарника обыкновенного, з. канадского, з. гигантского эффективны против Staphylococcus aureus, Streptococcus faecalis, Bacillus subtilis, Escherichia coli, Chlamydia pneumoniae, Pseudomonas aeruginosa . Водный экстракт корневищ золотарника чилийского подавлял активность Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa .
Противогрибковая активность
Деацилированные тритерпеновые сапонины золотарника обыкновенного проявляли противогрибковую активность в отношении видов рода Candida (Candida аlbicans, C. tropicalis, C. krusei, C. parapsilosis, C. pseudotropicalis, C.
guilliermondi, C. glabrata и Cryptococcus neoformans) выше, чем смесь сапонинов . В других экспериментах показана противогрибковая активность спиртового экстракта золотарника обыкновенного в отношении дерматофитов, особенно в отношении Trichophyton mentagrophytes, Microsporum gypseum и M. canin.
Противогрибковая активность в отношении Candida albicans была очень низкой.
Противомикробную активность также проявляет и золотарник гигантский .
Противоопухолевая активность
Тритерпеновые сапонины проявляют противоопухолевую активность . Значительная противоопухолевая активность виргауреасапонина Е, выделенного из золотарника обыкновенного, в дозе 1 мг/кг/сут. была установлена в экспериментальной модели саркомы у мышей . В другой серии экспериментов был продемонстрирован противоопухолевый эффект полисахаридов золотарника обыкновенного в отношении простаты, рака молочной железы, меланомы и рака легких. Рост опухоли подавлялся в дозе 5 мг/кг .
Противоопухолевая активность наблюдалась у гексанового, хлороформного, этилацетатного и 50% водно–спиртового экстракта золотарника канадского в отношении клеток линии HeLa и MCF–7 .
Иммуномодулирующая активность Иммуномодулирующая активность (индукция макрофагов и активация NK–клеток), а также противоопухолевая активность тритерпенового сапонина виргауреасапонина Е была показана в экспериментах in vitro .
Антиагрегантная активность Дитерпены, содержащиеся в водном экстракте золотарника чилийского, ингибировали АДФ–индуцированную агрегацию тромбоцитов в крови человека; а сапонины блокировали кальциевые каналы, что свидетельствовало об антиагрегантной активности золотарника чилийского .
Сырье золотарника входит в состав 21 наименования мирового фармацевтического рынка, из которых в России представлены 6 (таблица 1.2).
–  –  –
Золотарник обыкновенный имеет медоносное значение ; является кормовым растением для северных оленей, амурского горала и бобров. Однако, для овец это растение ядовито .
Применялся в качестве дубильного и красильного растения, из травы и цветков которого извлекали желтую и коричневую краски .
Эфирное масло золотарника обладает оригинальным запахом .
Листья золотарника используются как ароматическая приправа .
Таким образом, виды рода золотарник являются довольно распространенными растениями, содержащими богатый комплекс БАС, нашедшими свое применение не только в медицине, но и в других сферах деятельности.
ВЫВОДЫ ПО ОБЗОРУ ЛИТЕРАТУРЫ
1. В результате изучения литературных данных установлено, что фитохимическое изучение золотарника кавказского не проводилось, но имеются данные, что для видов рода Золотарник установлено присутствие таких классов биологически активных соединений, как флавоноиды, фенолкарбоновые кислоты, кумарины, сапонины, полиацетиленовые соединения, полисахариды, ароматические соединения.
2. Изученные в большей или меньшей степени виды рода Золотарник обладают широким спектром фармакологической активности: диуретическим, спазмолитическим, противовоспалительным и т.д.
3. Приведенные сведения о культивировании видов рода Золотарник свидетельствуют о перспективности изучения возможностей выращивания золотарника кавказского.
4. Анализ данных литературы показал, что золотарник кавказский является фармакогностически неизученным растением Кавказа.
ГЛАВА 2 ОБЪЕКТЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
–  –  –
Объектами исследования являлись трава и корневища с корнями золотарника кавказского (рисунок 2.1). Трава заготавливалась в начале цветения путем срезания верхней части длиной 25-30 см без грубых оснований стеблей с изменившими окраску листьями в 2009–2013 гг. на территории Северного Кавказа:
Республика Карачаево–Черкесия, Карачаевский район (перевал Гумбаши, ущелье р. Даут к перевалу Учкулан, верховье р. Даут на перевале Эпчик), Республика Кабардино–Балкария, Чегемский район (г. Чегем) и Зольский район (урочище Джилы–Су), также использовалась трава, заготовленная от культивируемых растений в 2011– 2013 гг. Траву з. кавказского сушили на воздухе в тени под навесами и в хорошо проветриваемых помещениях. После сушки из сырья удаляли часть стеблей, почерневшие листья и посторонние примеси. Корневища с корнями заготавливали от культивируемого золотарника кавказского ранней весной 2014 г., выкапывая вручную. Корневища с корнями очищали от остатков надземных частей и земли, промывали, сушили в хорошо проветриваемом помещении.
Рисунок 2.1 – Золотарник кавказский (Solidago caucasica Kem.
–  –  –
2.2.1 Химические реакции Наличие биологически активных веществ в траве и корневищах с корнями з. кавазского устанавливали с помощью общепринятых качественных реакций .
Для обнаружения флавоноидов использовали спиртовое извлечение (спирт этиловый 70%) в соотношении 1:10, с которым проводили цианидиновую пробу (восстановление магнием в присутствии хлористоводородной кислоты концентрированной) и реакцию с алюминия хлоридом.
Для установления наличия тритерпеновых сапонинов готовили водное извлечение 1:10 кипячением на водяной бане в течение 10 минут, охлаждали и фильтровали. В 2 пробирки помещали по 2 мл фильтрата. В первую пробирку прибавляли хлористовородную кислоту 0,5 М, во вторую – натрия гидроксид 0,5 М. Пробирки встряхивали и наблюдали пену как в кислой, так и в щелочной средах (тритерпеновые сапонины). Для проведения реакции Либермана– Бурхарда навеску травы золотарника кавказского (10,0 г) обезжиривали бензолом, проводили экстракцию последовательно хлороформом и метанолом. Метанольное извлечение упаривали и к сухому остатку прибавляли укусный ангидрид и серную кислоту концентрированную.
Присутствие дубильных веществ определяли в водном извлечении (массо–объемное соотношение 1:10, продолжительность экстракции 5 мин) по реакции с раствором квасцов железоаммонийных.
Для обнаружения кумаринов была использована лактонная проба. Готовили извлечение из сырья золотарника кавказского спиртом этиловым 95% в соотношении 1:10 путем кипячения в течение 15–20 мин на водяной бане с обратным холодильником. К 5 мл приготовленного извлечения прибавляли 10 капель спиртового раствора натрия гидроксида 10% и нагревали на водяной бане.
Затем добавляли 10 мл воды и 15 капель хлористоводородной кислоты 10%.
Идентификацию аминокислот проводили в кислотном извлечении (хлористоводородная кислота, массо–объемное соотношение 1:10, температура 70 С, 10 мин) по биуретовой реакции и реакции с нингидрина раствором.
Обнаружение углеводов осуществляли с помощью реакции Бертрана и со спиртом этиловым 95%.
2.2.2 Хроматографические методы исследования Для проведения хроматографического анализа использовалась хроматографическая бумага «Filtrak», а также пластинки «Sorbfil» (ПТСХ–П–В–УФ).
Пластинки для ТСХ–анализа предварительно выдерживали в сушильном шкафу при температуре 100–105 °С в течение 1 часа с целью их активирования. Методика обнаружения: на линию старта хроматографической пластинки размером 1515 или хроматографической бумаги наносили с помощью микрошприца по 5 мкл или 10 мкл соответственно извлечения из травы з. кавказского. Параллельно наносили по 5 мкл растворов рабочих стандартных образцов. Хроматографические камеры предварительно насыщали парами растворителей в течение 40 – 60 мин в случае ТСХ и в течение 12–16 часов в случае бумажной хроматографии. Хроматографирование осуществляли восходящим способом в герметично закрытой камере, содержащей соответствующую систему растворителей.
Анализ хроматограммы проводили, когда фронт растворителя достигал 13 см для ТСХ или 40 см для БХ. После хроматографирования пластинки высушивали на воздухе под вытяжным шкафом, просматривали в видимом и УФ–свете, обрабатывали определенным реагентом с помощью пульверизатора .
ВЭЖХ использовалась для анализа фенольных соединений и органических кислот. Анализ проводили на хроматографе фирмы «Gilston» с последующей компьютерной обработкой результатов исследования с помощью программы «Мультихром» для «Windows».
Идентификацию разделенных веществ проводили путем сопоставления времен удерживания пиков, полученных на хроматограмме пробы, со временами удерживания растворов стандартных образцов. Оценку количественного соотношения идентифицированных веществ проводили по площади пиков, используя метод внутренней нормализации .
Для установления моносахаридного состава углеводов проводили их кислотный гидролиз. Нейтральные сахара идентифицировали методом ГЖХ. ГЖХ
– анализ образцов снимали на хроматографе Сhrom-5 с пламенно– ионизационным детектором, стеклянная колонка (1,5 м 0,3 м) 5% Silicone XE
– 60 на хроматоне NAW – 0,2000,250 меш, 210 °С; газ–носитель – гелий, 30 мл/мин в виде ацетатов альдононитрилов.
Также для анализа БАС травы золотарника кавказского использовали хромато–масс–спектрометр AT–5850/5973 Agillent Technologies (США). Масс– спектрометр квадрупольный с диапазоном масс 2 – 950 а.е.м. имеет разрешающую способность 0,5 а.е.м. во всем рабочем диапазоне. Ионизация электронами 70 эВ. Чувствительность прибора составляет 0,01 нг по метилстеарату.
Для хроматографического разделения пробы использовали капиллярную колонку из плавленого кварца длиной 25 м и внутренним диаметром 0,25 мм. Неподвижная фаза НР–5ms Хьюлетт–Паккард с толщиной слоя 0,2 мкм. Хроматографирование проводили в режиме программирования температуры от 135 до 320 ° С со скоростью 7 град/мин. Температура инжектора и интерфейса 280 °С. Обработку данных проводили с помощью штатных программ прибора. Вещества в хроматографических пиках идентифицировали с помощью библиотечных программ с базой данных масс–спектров NIST.
2.2.3 Спектральные методы Метод УФ–спектрофотометрии был использован для качественного и количественного определения флавоноидов, фенолкарбоновых кислот и тритерпеновых гликозидов. УФ–спектры поглощения регистрировали на спектрофотометрах СФ–56 и СФ–2000 в кюветах с толщиной слоя 10 мм в области от 200 до 600 нм .
ИК–спектры образцов углеводов снимали на спектрофотометре Perkin– Elmer model 2000 в таблетках с KBr в соответствии с требованиями ОФС «Спектрометрия в инфракрасной области» .
Определение содержания макро– и микроэлементов в траве з. кавказского проводили с помощью полуколичественного спектрального метода. Анализ был проведен в центральной испытательной лаборатории «Кавказгеолсъемка». Изучение элементного состава осуществляли на дифракционном спектрографе ДФС–8–1 методом испарения.
2.2.4 Титриметрические методы Количественное определение дубильных веществ в траве золотарника кавказского проводили методом перманганатометрического титрования по методике ГФ XI, вып. 1 . Содержание свободных органических кислот определяли алкалиметрическим методом титрования по методике ГФ XI, вып. 2, ст.
39 «Плоды шиповника» .
2.2.5 Гравиметрические методы Изучение углеводов травы золотарника кавказского проводили гравиметрически по методу, изложенному в монографии Н.К. Кочеткова и M. Sinner .
2.2.6 Ресурсоведческие исследования Ресурсоведческие исследования были проведены согласно методическим указаниям .
Учетные площадки закладывались площадью 1 м 2, на одной учетной площадке помещалось в среднем 5–6 взрослых экземпляров растений. При этом форма площадки (прямоугольная, квадратная, округлая) существенной роли не играла.
После закладки учетных площадок на каждой из них собирали всю сырьевую фитомассу. Собранное сырье после сушки взвешивали.
Расчеты проводили с помощью формул (1, 2, 3, 4):
–  –  –
2.2.7 Фармакологические методы исследования Изучение «острой» токсичности проводилось по методу Кербера .
«Острая» токсичность была изучена на 42 аутбредных белых мышах самцах весом 22-30 г, прошедших карантин в течение 10 дней. Экстракт золотарника кавказского вводили внутрижелудочно при помощи зонда. Контрольная группа животных получала эквиобъемное количество физиологического раствора. Наблюдение за опытными животными проводилось в течение 2–х недель, в первый день непрерывно. Фиксировалось общее состояние животных, особенности их поведения, интенсивность и характер двигательной активности, время наступления смерти после введения препарата. Все расчеты проводились методом наименьших квадратов с использованием пробит анализа и обрабатывались с помощью программы «StatPlus 2009».
Изучение диуретической активности сухого экстракта золотарника кавказского было проведено на 24 белых крысах–самцах линии «Wistar» массой 300–450 г. Мочу собирали утром натощак в течение 2–х часов после 2,5% водной нагрузки. Сухой экстракт золотарника кавказского в виде водного раствора вводили за час до создания водной нагрузки. Интактная группа животных получала эквиобъемное количество воды.
Антибактериальное действие изучали в соответствии с ГФ XII .
2.2.8 Отбор проб для анализа Отбор проб для анализа осуществляли в соответствии с ОФС 42–0013–03 «Правила приемки лекарственного растительного сырья и методы отбора проб»
2.2.9 Методы макро– и микроскопического анализа сырья Макроскопический анализ лекарственного растительного сырья проводили визуально по ГФ XI .
Анатомические исследования выполняли по методике ГФ XI и Г.Г.
Фурста . Микропрепараты изучали с помощью микроскопов «Биолам» и «Биомед». Использовали объективы 4, 8, 10, 40, окуляр 16. Микрофотосъемка выполнена с использованием цифровых камер Nikon Coolpix и L33.0 mp cmos microscope digital camera eyepiece new.
Для проведения микроскопического анализа использовали временные препараты, приготовленные из высушенного сырья. Цельное сырье просветляли в системе спирт этиловый – глицерин – вода в соотношении 1:1:1. Срезы, полученные вручную с помощью лезвия, окрашивали реактивом на одревеснения – спиртовый раствор флороглюцина 1% и раствор серной кислоты 50%. Анатомическое строение рассмотрено в соответствии с ГФ XI, вып. 1 .
2.2.10 Определение числовых показателей Определение влажности, золы общей, золы, нерастворимой в 10% кислоте хлористоводородной, экстрактивных веществ в траве золотарника кавказского проводили по методикам, описанным в ГФ XI изд., вып. 1 и 2 , а также ГФ XII изд. .
2.2.11 Валидация методики количественного определения Валидация методики количественного определения флавоноидов в траве золотарника кавказского проводилась в соответствии руководством ICH «Валидация аналитических методик. Содержание и методология» .
Фармакология, клиническая фармакология ДИССЕРТАЦИЯ на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Научный руководитель: доктор...» стоматология Диссертация на соискание ученой степени доктора медицинских наук Научный консультант: доктор...»
«ЕВСЕЕВА ЕЛЕНА ВИКТОРОВНА ОПТИМИЗАЦИЯ СИСТЕМЫ КОМПЛЕКСНОГО КЛИНИКО – РАДИОЛОГИЧЕСКОГО СКРИНИНГА ЗАБОЛЕВАНИЙ МОЛОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ 14.01.13 – лучевая диагностика, лучевая терапия Диссертация на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Научный руководитель: доктор медицинских наук, профессор Рожкова Надежда Ивановна Москва – 2015г....»
«Каплунов Кирилл Олегович Оптимизация отношений врача и родственников ребенка-пациента в клинике детских инфекций 14.02.05 – социология медицины Диссертация на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Научный руководитель: доктор медицинских наук, профессор Любовь Васильевна Крамарь Волгоград – 201 СОДЕРЖАНИЕ Введение Глава 1. Обзор литературы 1.1.Клиника детских инфекций как особый раздел педиатрии 1.2.Модели...»
14.01.12 – онкология ДИССЕРТАЦИЯ на соискание ученой степени кандидата медицинских наук научные руководители – доктор медицинских наук профессор А.М. Беляев САНКТ-ПЕТЕРБУРГ ОГЛАВЛЕНИЕ СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ.. ВВЕДЕНИЕ.. Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.. 13 1.1. Введение.. 13 1.2....»
«Кудрявцев Виталий Вячеславович Современные проявления эпидемического процесса ротавирусной инфекции и пути оптимизации эпидемиологического надзора 14.02.02 ЭПИДЕМИОЛОГИЯ Диссертация на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Научный руководитель:...»
«Мисюрина Анна Евгеньевна ЭКСПРЕССИЯ MYC и BCL2 У БОЛЬНЫХ ДИФФУЗНОЙ В-КРУПНОКЛЕТОЧНОЙ ЛИМФОМОЙ 14.01.21 – гематология и переливание крови Диссертация на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Научные руководители: д.б.н. Ковригина А.М. к.м.н. Барях Е.А. МОСКВА – 2015 г. ОГЛАВЛЕНИЕ СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ ВВЕДЕНИЕ АКТУАЛЬНОСТЬ РАБОТЫ ЦЕЛЬ...»
«МЕЛКОНЯН ГЕОРГИЙ ГЕННАДЬЕВИЧ ХИРУРГИЧЕСКОЕ ЛЕЧЕНИЕ ЖЕЛЧНОКАМЕННОЙ БОЛЕЗНИ И ЕЕ ОСЛОЖНЕНИЙ хирургия - 14.01.17 Диссертация на соискание ученой степени доктора медицинских наук Научный консультант: доктор медицинских наук, профессор Мумладзе Р.Б. Москва ОГЛАВЛЕНИЕ СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ..4 ВВЕДЕНИЕ..6 Глава 1. ЖЕЛЧНОКАМЕННАЯ БОЛЕЗНЬ И МЕТОДЫ ЕЕ ЛЕЧЕНИЯ (ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ)..21...»
«СИТДИКОВ РУСТАМ ЗИННЯТУЛЛОВИЧ «Гигиеническая оценка условий труда и разработка медикопрофилактических мероприятий для сохранения здоровья работников пищевой промышленности (на примере кондитерской фабрики)» 14.02.01 – гигиена ДИССЕРТАЦИЯ на соискание ученой степени кандидата медицинских...»
«Юнеева Елена Андреевна МУЗЫКАЛЬНАЯ КУЛЬТУРА ИТАЛИИ XVII–XVIII вв.: ФЕНОМЕН БАРОЧНОЙ ОПЕРЫ 24.00.01 – теория и история культуры Диссертация на соискание ученой степени кандидата исторических наук Научный руководитель: кандидат исторических наук, доктор философских наук, профессор, Кибасова Галина...»
«ХАСИХАНОВ Султан Султанбекович ОТДАЛЕННЫЕ РЕЗУЛЬТАТЫ И КАЧЕСТВО ЖИЗНИ ПАЦИЕНТОВ ПОСЛЕ ХИРУРГИЧЕСКОГО ЛЕЧЕНИЯ ОГНЕСТРЕЛЬНЫХ РАНЕНИЙ ГРУДИ, ЖИВОТА И СОСУДОВ КОНЕЧНОСТИ 14.01.17 – хирургия Диссертация на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Научный руководитель: доктор медицинских наук А.Я. Дадаев Научный консультант:...»
«Антонив Татьяна Васильевна Гемангиомы и хемодектомы ЛОР-органов (клиника, диагностика, лечение) 14.01.03 – болезни уха, горла и носа Диссертация на соискание ученой степени доктора медицинских наук Научный консультант д.м.н., проф. Попадюк В.И. Москва – 2015г. ОГЛАВЛЕНИЕ. ВВЕДЕНИЕ.. 4 ГЛАВА 1 Современное состояние проблемы клиники, диагностики и лечения сосудистых...»
«ГАБДУЛЛИН ФАИЛЬ ХАРИСОВИЧ ВЕТЕРИНАРНО-САНИТАРНАЯ И БИОЛОГИЧЕСКАЯ ОЦЕНКА КАЧЕСТВА МЯСА КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА ПРИ ИСПОЛЬЗОВАНИИ В РАЦИОНЕ АЭПК «БИОГУММИКС» 06.02.05 – ветеринарная санитария, экология, зоогигиена и ветеринарносанитарная экспертиза 03.03.01 – физиология Диссертация на соискание...»
«Прилипко Нина Станиславовна СОВЕРШЕНСТВОВАНИЕ ОРГАНИЗАЦИИ МЕДИЦИНСКОЙ РЕАБИЛИТАЦИИ ВЗРОСЛОГО НАСЕЛЕНИЯ 14.02.03 – Общественное здоровье и здравоохранение ДИССЕРТАЦИЯ на соискание ученой степени доктора медицинских наук Научный консультант: д.м.н., профессор И.М. Сон Москва – ОГЛАВЛЕНИЕ СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ ВВЕДЕНИЕ... Глава...»
« ИНТОКСИКАЦИЕЙ 05.26.02 безопасность в чрезвычайных ситуациях Диссертация на соискание ученой степени доктора медицинских наук...»
2016 www.сайт - «Бесплатная электронная библиотека - Авторефераты, диссертации, конференции»
Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам , мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.
Золотарник – яркая и ароматная трава из семейства Астровые. Она встречается в умеренном климате по всей территории Евразии. От Германии до Кавказа и Сибири, на степных просторах и в ухоженных подворьях растение радует яркими цветами и множеством полезных свойств. Его используют в ландшафтном дизайне, а также в качестве лекарственного растения от массы недугов. В народе золотарник известен также под названиями солидаго, золотая розга, золотуха, железнянка, костовяз. Уход за ним несложен, но он быстро занимает большие территории, поэтому нуждается в строгом ограничении или наличии просторного участка.
Описание растения
Золотарник – многолетнее травянистое растение с длинным стержневым корнем. Одревесневающее корневище глубоко уходит в землю. На поверхности располагается слабо разветвленный побег высотой 30-100 см. Прямостоящий четырехгранный стебель покрывает гладкая кора. Она может окрашиваться в зеленый или красноватый оттенок.
Очередные листья на коротких черешках имеют овальную или яйцевидную форму. Нижние листочки заужены и вытянуты сильнее верхних. Края листовой пластины – пильчатые. Стебель и листья имеют очень короткое, едва заметное опушение.
В мае-сентябре наблюдается цветение золотарника. В пазухах верхних листьев распускаются густые щитковые соцветия. Они состоят из множества желтых колокольчатых бутонов. Длина цветов составляет 4-8 мм. По краям расположены колокольчики с желтыми лепестками. Центральные экземпляры отличаются буро-желтой расцветкой. Бутоны раскрываются от края соцветия к центру.
После опыления завязываются плоды – семянки цилиндрической формы с продольными ребрами. Их длина составляет 3-4 мм. Опушенное покрытие стенок завершается бурым хохолком.
Популярные виды
Род золотарниковых насчитывает более 100 видов. Из них в культуре используются менее десяти.
Является наиболее распространенным. Его можно встретить на просторах Евразии и Северной Африки. Высота травянистого растения с незначительно разветвленными побегами составляет 60-130 см. Овальные листья у основания стебля имеют черешки, а верхние листовые пластины являются сидячими. Округлые и цилиндрические соцветия распускаются в июне-августе. Растение используется в лечебных целях и является хорошим медоносом.
Растение распространено на предгорьях востока Северной Америки и в Евразии. Его стебли отличаются более крупными размерами (50-150 см). Верхняя часть побега и листва густо покрыты короткими ворсинками. Широколанцетные листья с зубчатыми краями в длину составляют 12-15 см. Зацветает в августе-сентябре узкими желтыми соцветиями.
Этот вид стал прародителем большинства декоративных сортов. Растения отличаются более компактными размерами и красивой листвой. Даже без цветов они вызывают живой интерес у садоводов. Наиболее популярные разновидности:
- страхленкрон – разветвленные побеги высотой до 80 см покрыты яйцевидными ярко-зелеными листочками, верхушку стебля украшает густое ярко-желтое соцветие;
- голдтанне – куст высотой до 2 м распускает в середине сентября густые желто-оранжевые соцветия длиной около 50 см;
- спатголд – высота куста с лимонными соцветиями не превышает 80 см;
- перкео – компактные кустики высотой до 50 см в начале августа покрываются ярко-желтыми густыми соцветиями.
Побеги этого вида достигают 2 м в высоту. Они образуют стройные заросли, покрытые ярко-зеленой цельнокрайной листвой. В начале августа на солидаго распускаются ярко-желтые соцветия длиной 30-40 см. Они сохраняются на растении около 50 дней.
Способы размножения
Размножение золотарника можно проводить следующими способами:
- Посев семян. Сеять нужно семена, которым не более года, так как они быстро теряют всхожесть. Делают это сразу в открытом грунте. Весной, когда температура установится на уровне +18°C и выше, на отведенном участке делают неглубокие лунки и стараются равномерно распределить в них семена. Почву умеренно увлажняют. Всходы можно обнаружить через 14-20 дней. В первый год сеянцы зацветают редко.
- Деление куста. Уже после первого года жизни золотарник дает прикорневые отростки, однако деление лучше проводить спустя 3-4 года. Весной или летом кусты можно разделить на несколько частей. Между саженцами необходимо оставить дистанцию 40 см.
- Укоренение черенков. Для укоренения используют верхние части стебля без соцветий. Летом можно нарезать боковые отростки. Укоренение производят в горшочках с песчано-торфяной смесью. Через 1-2 недели саженцы отращивают корни, а еще через 14-20 дней они готовы к пересадке на постоянное место.
Правила ухода
Золотарник – необременительное, живучее растение. Оно понравится занятым или ленивым садоводам. Цветок предпочитает хорошо освещенные участки сада. На них солидаго лучше разрастается и образует больше бутонов. Также он может выдерживать небольшую полутень, но в этом случае цветение начнется позже.
Для посадки подойдут плодородные почвы с нейтральной или слабокислой реакцией. Растение может приспосабливаться к обедненным, тяжелым почвам. Золотарник нуждается в регулярном поливе, но без застоя воды в грунте. Частые засухи приводят к болезни и уменьшению цветения.
Удобрение золотарнику необходимо только на бедных почвах. Избыток минеральных веществ приводит к сильному выгону стеблей и уменьшению цветения. Можно использовать коровяк или минеральные универсальные удобрения. Растворы вносят в землю ежемесячно до завершения цветения.
Чтобы избежать обильного самосева, рекомендуется обрезать соцветия сразу после увядания. Это убережет участок от полного захвата золотарником. Высокие кусты стоит подвязать или подпереть. Осенью поросль почти полностью срезают, оставляя всего 10-15 см побегов над поверхностью почвы. Растения устойчивы к морозам и дополнительного укрытия не требуют.
Золотарник подходит для использования в ландшафтном дизайне. Гибридные сорта золотарника больше подходят для комбинированной клумбы, так как не дают самосева и не угнетают соседние растения. Их используют в миксбордерах, рабатках, альпинариях и рокариях. Желтые кусты хороши в соседстве с хвойными растениями, а также с цветущими флоксами, шалфеем, астрами. Этот красивый медонос привлечет на участок много полезных насекомых и бабочек.
Золотарник отлично смотрится не только на лужайке, но и в вазе. Букет простоит до двух недель и будет распространять приятный, ненавязчивый аромат. Можно использовать цветы для высушивания.
Состав и лечебные свойства
Золотарник канадский и обыкновенный широко используются в народной медицине и ветеринарии. Они содержат большое количество органических кислот, сапонинов, фенольных соединений, флавоноидов, полисахаридов, жирных масел и других биоактивных веществ.
Лекарственное сырье в виде облиственных стеблей и соцветий собирают в период цветения. Сушат их в хорошо проветриваемом помещении. После сушки плотные стебли рекомендуется обмолотить и удалить. Полученный материал хранят в тканевых мешочках или бумажных пакетах в течение года.
Отвар, чай, мед и настои из золотарника обладают следующими действиями на организм:
- отхаркивающее;
- противомикробное;
- мочегонное;
- ранозаживляющее;
- противовоспалительное.
Народные лекари утверждают, что с помощью золотарника можно избавиться от камней в почках, интоксикации организма и диареи, нарушений менструального цикла, урологических расстройств, а также от венерических заболеваний.
Противопоказания
Важно помнить, что кроме полезных свойств, есть и противопоказания. Золотарник содержит небольшое количество токсинов, которые при передозировке негативно сказываются на организме. Лекарства на основе солидаго противопоказаны беременным и кормящим женщинам, а также детям до 14 лет. Растение нельзя употреблять при болезнях почек и кровеносной системы, а также при наличии аллергии. При появлении недомогания следует немедленно прекратить прием снадобий и обратиться к врачу.
480 руб. | 150 грн. | 7,5 долл. ", MOUSEOFF, FGCOLOR, "#FFFFCC",BGCOLOR, "#393939");" onMouseOut="return nd();"> Диссертация - 480 руб., доставка 10 минут , круглосуточно, без выходных и праздников
Федотова Виктория Владимировна. Фармакогностическое изучение золотарника кавказского (Solidago caucasica Kem.-Nath.): диссертация... кандидата фармацевтических наук: 14.04.02 / Федотова Виктория Владимировна;[Место защиты: Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования Волгоградский государственный медицинский университет Министерства здравоохранения Российской Федерации http://www.pmedpharm.ru/].- Волгоград, 2014.- 163 с.
Введение
ГЛАВА 1 Фармакогностическая характеристика видов рода золотарник 13
1.1 История и распространение видов рода Золотарник 13
1.2 Ботаническая характеристика видов рода Золотарник 16
1.3 Систематическое положение рода Золотарник 17
1.4 Химический состав изученных видов рода Золотарник 18
1.5 Использование сырья видов рода Золотарник 22
Выводы по обзору литературы 29
ГЛАВА 2 Объекты и методы исследования 30
2.1 Объекты исследования 30
2.2 Методы исследования
2.2.1 Химические реакции 31
2.2.2 Хроматографические методы исследования 32
2.2.3 Спектральные методы 33
2.2.4 Титриметрические методы 34
2.2.5 Гравиметрические методы 34
2.2.6 Ресурсоведческие исследования 34
2.2.7 Фармакологические методы исследования 35
2.2.8 Отбор проб для анализа 36
2.2.9 Методы макро– и микроскопического анализа сырья
2.2.10 Определение числовых показателей 37
2.2.11 Валидация методики количественного определения 37
2.2.12 Микробиологическая чистота 37
2.2.13 Определение сроков годности 37
2.2.14 Методы статистической обработки 37
ГЛАВА 3 Предварительные ресурсоведческие исследования золотарника кавказского и изучение возможностей введения его в культуру 38
3.1 Определение урожайности травы золотарника кавказского 38
3.2 Расчет объема ежегодных заготовок 39
3.3 Исследования по введению золотарника кавказского в культуру 41
Выводы по главе 45
ГЛАВА 4 Морфологическое и анатомо–диагностическое изучение травы и корневищ с корнями золотарника Кавказского 46
4.1 Морфологическая характеристика «Золотарника кавказского травы» 46
4.2 Анатомическое строение листа 4.2.1 Строение листа с поверхности 47
4.2.2 Строение листа на поперечном срезе 50
4.3 Анатомическое строение стебля 52
4.3.1 Строение стебля с поверхности 52
4.3.2 Строение стебля на поперечном срезе 53
4.3.3 Строение стебля на продольном срезе
4.4 Анатомическое строение цветка 59
4.5 Микроскопический анализ измельченной «Золотарника кавказского травы» 64
4.6 Микроскопический анализ порошка «Золотарника кавказского травы» 66
4.7 Морфологическая характеристика корневищ с корнями золотарника кавказского 68
4.8 Анатомическое строение корневищ с корнями золотарника кавказского 69
Выводы по главе 73
ГЛАВА 5 Фитохимическое изучение травы и корневищ с корнями золотарника кавказского. разработка норм качества золотарника кавказского травы 74
5.1 Анализ травы и корневищ с корнями золотарника кавказского с помощью качественных реакций 74
5.2 Изучение фенольных соединений травы золотарника кавказского методом БХ 75
5.3 Обнаружение рутина методом ТСХ в «Золотарника кавказского траве» 78
5.4 Изучение фенольных соединений золотарника кавказского травы методом ВЭЖХ 79
5.5 Количественное определение флавоноидов в пересчете на рутин в «Золотарника кавказского траве» методом дифференциальной спектрофотометрии 82
5.6 Количественное определение фенолкарбоновых кислот в траве и корневищах с корнями золотарника кавказского методом спектрофотомерии в пересчете на кофейную кислоту 89
5.7 Количественное определение дубильных веществ в траве и корневищах с корнями золотарника кавказского 93
5.8 Изучение тритерпеновых гликозидов травы золотарника кавказского 95
5.9 Изучение полиацетиленовых соединений корневищ с корнями золотарника кавказского 5.10 Количественное определение органических кислот в траве золотарника кавказского 100
5.11 Изучение органических кислот травы золотарника кавказского методом ВЭЖХ 101
5.12 Изучение углеводов травы золотарника кавказского 103
5.13 Биологически активные соединения травы золотарника кавказского, идентифицированные методом ГЖХ–МС 109
5.14 Изучение аминокислотного состава травы золотарника кавказского 112
5.15 Изучение минерального состава травы золотарника кавказского 113
5.16 Определение некоторых числовых показателей травы и корневищ с корнями золотарника кавказского 115
5.17 Микробиологическая чистота «Золотарника кавказского травы» 117
5.18 Установление срока годности «Золотарника кавказского травы» 118
Выводы по главе 120
ГЛАВА 6 Предварительные технологические исследования по разработке «золотарника кавказского травы экстракта сухого», стандартизация полученного экстракта и предварительное изучение его фармакологической активности 121
6.1 Получение «Золотарника кавказского травы экстракта сухого» 121
6.2 Разработка методик стандартизации «Золотарника кавказского травы
экстракта сухого» 122
6.2.1 Общие показатели 122
6.2.2 Изучение фенольных соединений 124
6.2.3 Количественное определение суммы флавоноидов в пересчете на рутин методом дифференциальной спектрофотометрии 125
6.2.4 Количественное определение фенолкарбоновых кислот в пересчете на кофейную кислоту методом спектрофометрии
6.3 Установление срока годности «Золотарника кавказского травы экстракта сухого» 131
6.4 Предварительное изучение фармакологической активности
6.4.1 Определение «острой» токсичности «Золотарника кавказского травы» 133
6.4.2 Патоморфологические изменения в органах, вызванные введением извлечения из травы золотарника кавказского в дозе 10000 мг/кг 134
6.4.3 Изучение диуретической активности «Золотарника кавказского травы экстракта сухого» 140
6.4.4 Изучение антибактериального действия «Золотарника кавказского травы экстракта сухого» 141
Выводы по главе 144
Заключение 145
Список литературы
Химический состав изученных видов рода Золотарник
В народной медицине настой и отвар травы золотарника обыкновенного используется как диуретическое, антисептическое, противовоспалительное средство при болезнях почек и мочевого пузыря (мочекаменная болезнь, холецистит, язвенный цистит, энурез), гипертрофии предстательной железы. Однако, сфера применения золотарника намного шире. Он оказывает вяжущее, потогонное, отхаркивающее, гемостатическое действие, применяется при желчнокаменной болезни, сахарном диабете, бронхиальной астме, туберкулезе легких, острых респираторных инфекциях, остром ларингите, ангине, коклюше, подаг 23
ре, артритах, энтерите, колите, меноррагии, белях, экземе, асците. В Молдавии, Белоруссии соцветия используют наружно в смеси со сливками, свиным жиром или сливочным маслом при туберкулезе кожи, дерматитах, ожогах, ревматизме. В Коми АССР, на Кавказе, в Сибири – при скрофулезе. В китайской народной медицине семена золотарника обыкновенного применяют для разжижения крови и устранения вздутия кишечника, а также при нарушениях менструального цикла, холере, диарее, появлении крови в моче у детей. На Кавказе настойки подземной части золотарника применяются в качестве ранозаживляющего средства .
Применение золотарника в научной медицине
Золотарник обыкновенный, з. канадский и з. гигантский включены в Европейскую фармакопею , з. канадский и з. гигантский – в Британскую травяную фармакопею . В СССР была разработана ФС «Трава золотарника канадского» . Для видов рода Золотарник установлен целый спектр фармакологической активности. Мочегонная активность Флавоноидная фракция золотарника обыкновенного в дозе 25 мг/кг показывала увеличение диуреза у крыс на 88% через 24 ч по сравнению с контрольным образцом (NaCl, 5 мл, пероральное введение), при этом наблюдалось снижение ночной экскреции калия и натрия и увеличение экскреции кальция.
Значительное увеличение диуреза у крыс с повышенным выведением натрия, калия и хлорид–ионов наблюдалось после приема внутрь золотарника обыкновенного (0,3% флавоноидов, 4,64 мл / кг и 10,0 мл / кг). Причем низкая доза оказалась более эффективной .
Противовоспалительная активность Противовоспалительная активность сапонинов золотарника обыкновенного была испытана на модели отека у крыс. В результате наблюдалось значительное снижение отека после внутривенного введения 1,25-2,5 мг/кг комплекса тритерпеновых сапонинов . Лабдановые дитерпены, выделенные из золотарника чилийского, при хло-ровородно–этанольно индуцированных поражениях желудка у мышей проявили гастропротектиновую активность .
Дитерпен солидагогенон, содержащийся в водном экстракте из соцветий золотарника чилийского, также проявил гастропротективную активность .
На крысах был протестирован препарат Phytodolor на противовоспалительную, обезболивающую и жаропонижающую активность. Активность была такой же, как и у стандартных образцов салицилового спирта и индометацина .
Сапонины, флавоноиды и кофейная кислота, выделенные из золотарника обыкновенного ингибировали активность лейкоцитарной эластазы и протеазы, участвующих в прогрессировании воспаления. Сапонины стимулировали синтез и высвобождение глюкокортикоидов в надпочечниках .
Водный экстракт золотарника обыкновенного значительно подавлял воспалительную реакцию на коже морских свинок, индуцированную рентгеновским излучением . 46% водно–спиртовый экстракт золотарника чилийского оказывал противовоспалительную активность за счет ингибирования дигидрофолат редуктазы.
Лейокарпозид, выделенный из золотарника чилийского, оказывал противовоспалительный и болеутоляющий эффект .
Выделенная из золотарника гигантского 3,5–ди–О–кофейная кислота обладала противовоспалительными свойствами, не имея побочных эффектов, и поэтому исследовалась как потенциальное лекарственное средство .
Антиоксидантная активность Водно–спиртовый экстракт золотарника обыкновенного как компонент препарата Phytodolor ингибировал образование активных форм кислорода . Анальгетическая активность Экстракт золотарника обыкновенного проявлял анальгетическую активность, воздействуя на брадикининовые рецепторы . Установлена эффективность жидкого экстракта золотарника чилийского при лечении люмбаго: в течение 15 дней кожу смазывали гелем, содержащим 5% экстракта золотарника чилийского, и добились значительного анальгетиче-ского эффекта . Спазмолитическая активность Наличие флавоноидов (кверцетин и кемпферол) в золотарнике обыкновенном обуславливало установленное вазодилаторное действие, зависящее от ингибирования протеинкиназы С, ингибирования фосфодиэстеразы и циклических нуклеотидов, а также уменьшения поступления ионов Ca2 + .
Определение числовых показателей
Наличие биологически активных веществ в траве и корневищах с корнями з. кавазского устанавливали с помощью общепринятых качественных реакций .
Для обнаружения флавоноидов использовали спиртовое извлечение (спирт этиловый 70%) в соотношении 1:10, с которым проводили цианидино-вую пробу (восстановление магнием в присутствии хлористоводородной кислоты концентрированной) и реакцию с алюминия хлоридом.
Для установления наличия тритерпеновых сапонинов готовили водное извлечение 1:10 кипячением на водяной бане в течение 10 минут, охлаждали и фильтровали. В 2 пробирки помещали по 2 мл фильтрата. В первую пробирку прибавляли хлористовородную кислоту 0,5 М, во вторую – натрия гидроксид 0,5 М. Пробирки встряхивали и наблюдали пену как в кислой, так и в щелочной средах (тритерпеновые сапонины). Для проведения реакции Либермана– Бурхарда навеску травы золотарника кавказского (10,0 г) обезжиривали бензолом, проводили экстракцию последовательно хлороформом и метанолом. Мета-нольное извлечение упаривали и к сухому остатку прибавляли укусный ангидрид и серную кислоту концентрированную.
Присутствие дубильных веществ определяли в водном извлечении (мас-со–объемное соотношение 1:10, продолжительность экстракции 5 мин) по реакции с раствором квасцов железоаммонийных.
Для обнаружения кумаринов была использована лактонная проба. Готовили извлечение из сырья золотарника кавказского спиртом этиловым 95% в соотношении 1:10 путем кипячения в течение 15–20 мин на водяной бане с обратным холодильником. К 5 мл приготовленного извлечения прибавляли 10 капель спиртового раствора натрия гидроксида 10% и нагревали на водяной бане. Затем добавляли 10 мл воды и 15 капель хлористоводородной кислоты 10%. Идентификацию аминокислот проводили в кислотном извлечении (хлористоводородная кислота, массо–объемное соотношение 1:10, температура 70 С, 10 мин) по биуретовой реакции и реакции с нингидрина раствором.
Обнаружение углеводов осуществляли с помощью реакции Бертрана и со спиртом этиловым 95%.
Для проведения хроматографического анализа использовалась хромато-графическая бумага «Filtrak», а также пластинки «Sorbfil» (ПТСХ–П–В–УФ). Пластинки для ТСХ–анализа предварительно выдерживали в сушильном шкафу при температуре 100–105 С в течение 1 часа с целью их активирования. Методика обнаружения: на линию старта хроматографической пластинки размером 1515 или хроматографической бумаги наносили с помощью микрошприца по 5 мкл или 10 мкл соответственно извлечения из травы з. кавказского. Параллельно наносили по 5 мкл растворов рабочих стандартных образцов. Хроматографи-ческие камеры предварительно насыщали парами растворителей в течение 40 – 60 мин в случае ТСХ и в течение 12–16 часов в случае бумажной хроматографии. Хроматографирование осуществляли восходящим способом в герметично закрытой камере, содержащей соответствующую систему растворителей.
Анализ хроматограммы проводили, когда фронт растворителя достигал 13 см для ТСХ или 40 см для БХ. После хроматографирования пластинки высушивали на воздухе под вытяжным шкафом, просматривали в видимом и УФ–свете, обрабатывали определенным реагентом с помощью пульверизатора .
ВЭЖХ использовалась для анализа фенольных соединений и органических кислот. Анализ проводили на хроматографе фирмы «Gilston» с последующей компьютерной обработкой результатов исследования с помощью программы «Мультихром» для «Windows».
Идентификацию разделенных веществ проводили путем сопоставления времен удерживания пиков, полученных на хроматограмме пробы, со временами удерживания растворов стандартных образцов. Оценку количественного со 33 отношения идентифицированных веществ проводили по площади пиков, используя метод внутренней нормализации .
Для установления моносахаридного состава углеводов проводили их ки слотный гидролиз. Нейтральные сахара идентифицировали методом ГЖХ. ГЖХ – анализ образцов снимали на хроматографе Сhrom-5 с пламенно– ионизационным детектором, стеклянная колонка (1,5 м 0,3 м) 5% Silicone XE – 60 на хроматоне NAW – 0,2000,250 меш, 210 С; газ–носитель – гелий, 30 мл/мин в виде ацетатов альдононитрилов.
Также для анализа БАС травы золотарника кавказского использовали хромато–масс–спектрометр AT–5850/5973 Agillent Technologies (США). Масс– спектрометр квадрупольный с диапазоном масс 2 – 950 а.е.м. имеет разрешающую способность 0,5 а.е.м. во всем рабочем диапазоне. Ионизация электронами 70 эВ. Чувствительность прибора составляет 0,01 нг по метилстеарату. Для хроматографического разделения пробы использовали капиллярную колонку из плавленого кварца длиной 25 м и внутренним диаметром 0,25 мм. Неподвижная фаза НР–5ms Хьюлетт–Паккард с толщиной слоя 0,2 мкм. Хроматогра-фирование проводили в режиме программирования температуры от 135 до 320 С со скоростью 7 град/мин. Температура инжектора и интерфейса 280 С. Обработку данных проводили с помощью штатных программ прибора. Вещества в хроматографических пиках идентифицировали с помощью библиотечных программ с базой данных масс–спектров NIST.
Расчет объема ежегодных заготовок
При рассматривании ложноязычковых цветков с обеих сторон видны прямоугольные клетки эпидермиса с прямыми или слабоизвилистыми равномерно утолщенными стенками, с округлыми хроматопластами (рисунок 4.18). Кутикула поперечно-морщинистая, устьица не обнаружены (рисунок 4.19). У основания цветка имеются простые многоклеточные тупоконусовидные волоски, тонкостенные с гладкой поверхностью (рисунок 4.20).
При рассмотрении эпидермиса трубчатого цветка (рисунок 4.21-1) видны прямоугольные клетки с прямыми или слабоизвилистыми равномерно утолщенными стенками, с многоугольными хроматопластами (рисунок 4.21-3). Кутикула поперечно-морщинистая, устьица не обнаружены (рисунок 4.21-2). По краю цветка встречаются пучковые волоски, состоящие их нескольких клеток, сросшихся друг с другом (рисунок 4.21-4). Рисунок 4.18 – Фотография строения эпидермиса ложноязычкового цветка золотарника кавказского (ув. 128) Хроматопласты и морщинистость кутикулы ложноязычкового цветка Простые волоски у основания ложноязычкового цветка золотарника кавказского (ув. 128) Имеются многочисленные простые многоклеточные волоски с толстой стенкой и тонкой полостью внутри. Некоторые волоски двухконечные (рисунок 4.21-5). Пыльца округлая, поверхность шиповатая, трехбороздная (рисунок 4.21-6). 2 - складчатость кутикулы (ув. х160); 3 - хроматопласты (ув. х160); 4 - пучковые волоски (ув. х128); 5 - простые волоски (ув. х128); 6 - пыльца (ув. х640) Клетки эпидермиса листочков обвертки также прямоугольные с прямыми или слабоизвилистыми равномерно утолщенными стенками и поперечно-морщинистой кутикулой. Имеются многочисленные устьица. Устьичный аппарат аномоцитного типа, околоустьичных клеток 4-6. Замыкающие клетки устьиц чечевицевидные или сферовидные. Устьица расположены в одной плоскости с эпидермисом. Головчатые волоски на одноклеточной ножке с одно-, двух-клеточной головкой (рисунок 4.22). По краю цветка располагаются сосочковид-ные выросты (рисунок 4.23-1). На поверхности видны простые многоклеточные остроконусовидные и бичевидные волоски (рисунок 4.23-2). По краю листочков располагаются бахромчатые волоски (рисунок 4.23-3). Эфирномасличные железки ярусного типа (рисунок 4.23-4).
Анализ проводили в соответствии с указаниями статьи «Техника микроскопического и микрохимического исследования лекарственного растительного сырья» и по методике приготовления микропрепаратов измельченной (резаной или порошка) травы (листья, цветки, стебли) (ГФ XI, в. 1, с. 278 ).
При рассмотрении микропрепаратов (рисунок 4.25) с поверхности верхней стороны листа видны изодиаметрические клетки эпидермиса многогранной, овальной или округлой формы со слабоизвилистыми равномерно утолщенными стенками. Клетки нижнего эпидермиса мельче, с более извилистыми боковыми стенками. Местами может наблюдаться слабо выраженная морщинистость кутикулы (продольно–морщинистая). Устьичный аппарат аномоцитного типа; околоустьичных клеток 4-5. Они такой же формы, как и покровные клетки эпидермиса. Замыкающие клетки устьиц чечевицевидные овальной формы. Устьица расположены в одной плоскости с эпидермисом. Волоски железистые и простые. Железистые короткие на одно–, двухклеточной ножке и с одноклеточной головкой, их места прикрепления обычные. Волоски простые многоклеточные остроконусовидные, тонкостенные с гладкой поверхностью; места их прикрепления обычные или у основания некоторых волосков образуется розетка из клеток эпидермиса. Пыльца округлая, поверхность ее шиповатая, трехбо-роздная.
Таким образом, для цельного и измельченного сырья «Золотарника кавказского трава» можно выделить следующие диагностические признаки: клетки эпидермиса с извилистыми стенками и слабо выраженной продольно– морщинистой кутикулой. На обеих сторонах листа встречаются многочисленный волоски и железки. Волоски простые многоклеточные остроконусовидные, тонкостенные с гладкой поверхностью; места их прикрепления обычные или у основания некоторых волосков образуется розетка из клеток эпидермиса. Желе 65 зистые волоски короткие на одно-, двухклеточной ножке и с одноклеточной головкой. 3 Рисунок 4.25 – Микрофотографии измельченного сырья золотарника кавказского (ув. 640): 1 – эпидермис верхней стороны листа; 2 – эпидермис нижней стороны листа; 3 – волоски простой и железистый; 4 – пыльца Характерной особенностью золотарника кавказского является то, что участки колленхимы коры стебля чередуются с хлоренхимой, а эндодерма содержит хлоропласты. На эпидермисе листочков обвертки встречаются эфирномас 66 личные железки ярусного типа. Пыльца округлая, поверхность шиповатая, трехбороздная. Микроскопический анализ порошка «Золотарника кавказского травы» Анализ проводили в соответствии с указаниями статьи «Техника микроскопического и микрохимического исследования лекарственного растительного сырья» и по методике приготовления микропрепаратов порошка травы (ГФ XI, в. 1, с. 278 ).
При рассмотрении микропрепаратов порошка (рисунок 4.26) видны обрывки элементов эпидермиса многогранной, овальной или округлой формы со слабоизвилистыми или извилистыми равномерно утолщенными стенками. Устьичный аппарат аномоцитного типа; околоустьичных клеток 4-5. Они такой же формы, как и покровные клетки эпидермиса. Замыкающие клетки устьиц чечевицевидные овальной формы. Видны железистые волоски и обрывки простых волосков. Железистые короткие на одно–, двухклеточной ножке и с одноклеточной головкой, их места прикрепления обычные. Волоски простые многоклеточные остроконусовидные, тонкостенные с гладкой поверхностью; места их прикрепления обычные или у основания некоторых волосков образуется розетка из клеток эпидермиса. Видны обрывки сосудов. Пыльца округлая, поверхность ее шиповатая, трехбороздная.
Морфологическая характеристика корневищ с корнями золотарника кавказского
Для изучения углеводов травы золотарника кавказского навеску сырья (30,0 г) двукратно экстрагировали хлороформом (100 мл) с последующим высушиванием.
Затем остаток сырья дважды экстрагировали кипящим спиртом этиловым 82% для выделения спирторастворимых сахаров (СРС). Полученные экстракты упаривали и хроматографировали на бумаге Filtrak FN 7, 12 в системе бутанол– пиридин–вода (6:4:3) в течение 17-18 часов со стандартными образцами нейтральных моносахаридов. СРС по данным БХ представлены глюкозой, галактозой (проявитель кислый фталат анилина), фруктозой и сахарозой (проявитель 5% мочевина). Идентификацию углеводов проводили в сравнении со стандартными образцами и по величине Rf.
Затем проводили выделение полисахаридов, последовательно экстрагируя водорастворимые полисахариды водой (ВРПС), смесью растворов щавелевой кислоты и аммония оксалата – пектиновые вещества (ПВ), раствором щелочи – гемицеллюлозы (ГМЦ).
Шрот, полученный после экстракции спиртом этиловым 82%, высушивали и проводили трехкратную экстракцию водой в соотношении 1:10; 1:5; 1:2 в условиях постоянного промешивания. Извлечения объединяли, фильтровали, упаривали при пониженном давлении с использованием роторного испарителя до 1/5 первоначального объема извлечения при температуре 45-50 С, затем осаждали трехкратным объемом спирта этилового 95%. Осадок центрифугировали, промывали спиртом этиловым, обезвоживали ацетоном, высушивали и взвешивали.
Для выделения пектиновых веществ остаток сырья, полученный после проведения предыдущих операций, экстрагировали смесью растворов щавелевой кислоты 0,5% и аммония оксалата 0,5% в равных пропорциях в соотношении шрот – экстрагент 1:5, 1:4 и 1:2 на водяной бане при 85-90 С в течение 3 часов. Далее экстракты объединяли, центрифугировали и диализовали. Проводили упаривание полученного извлечения до 1/20 первоначального объема, осаждали шестикратным объемом спирта этилового 95%. Полученный осадок центрифугировали, промывали спиртом этиловым, высушивали и взвешивали.
Для выделения гемицеллюлоз полученный остаток сырья экстрагировали четырех- и трехкратным объемом натрия гидроксида 5% при комнатной температуре. Полученные экстракты объединяли, нейтрализовали уксусной кислотой, диализовали, упаривали диализат до 1/10 первоначального объема и осаждали трехкратным объемом спирта этилового 95%. Осадок очищали, высушивали, как описано выше, и взвешивали.
Для установления моносахаридного состава углеводов проводили их кислотный гидролиз серной кислотой 10% в соотношении 1:4,9 при температуре 100-105 C в течение 10 часов для ВРПС; 24 ч – ПВ; 72 ч – для ГМЦ в запаянных ампулах . Затем содержимое ампул переносили в стаканчики, ампулы промывали 5 мл воды, нейтрализовали бария карбонатом по универсальному индикатору до нейтральной среды. Полученные растворы фильтровали, фильтры промывали водой до объема фильтратов 10 мл. Далее прибавляли трехкратный объем спирта этилового 95%, тщательно перемешивали, отстаивали 1-2 ч и образовавшиеся осадки фильтровали. Фильтраты упаривали на кипящей водяной бане до объема около 1 мл. Осадки бариевых солей уроновых кислот деио-низировали катионитом КУ-2 (Н+) до рН 3-4. Растворы фильтровали, упаривали до получения объема около 1 мл раствора.
Нейтральные сахара идентифицировали методом ГЖХ. ГЖХ – анализ образцов снимали на хроматографе Сhrom – 5 с пламенно–ионизационным детектором, стеклянная колонка (1,5 м 0,3 м) 5% Silicone XE – 60 на хроматоне NAW – 0,2000,250 меш, 210 С; газ-носитель – гелий, 30 мл/мин, в виде ацета 105
тов альдононитрилов. По количеству составляющих моносахаридов выделенные ВРПС и ПВ относятся к галактанам, ГМЦ – ксиланам. Наибольшее количество галактозы обнаружено во фракциях ПВ. Основными по содержанию являются фракции ПВ и ГМЦ.
Количество уроновых кислот определяли фотоэлектроколорометрическим методом по реакции взаимодействия с карбазолом в сернокислой среде . Глюкуроновые кислоты идентифицированы во всех фракциях, особенно в ПВ.
Количественное определение свободных (Кс) и этерифицированных (Кэ) карбоксильных групп проводили титриметрическим методом с потенциометри-ческой фиксацией точки эквивалентности на рН-метре марки «рН-340» с последующим вычислением степени этерификации.
ВРПС представляют собой порошок темно–коричневого цвета. При растворении в воде имеют показатель вязкости 3,0 (с 1%, вода). Титрометрическим методом установлено Кс = 1,98%, Кэ = 4,6%. Степень этерификации при этом составляет 69,9%. Следовательно, ВРПС являются высокоэтерифицированны-ми, что является основанием для их рекомендации к использованию в качестве вспомогательных веществ при приготовлении лекарственных форм: гелеобразо-вателей, загустителей, стабилизаторов и др.
Пектиновые вещества представляют собой порошок темно–коричневого цвета, при нагревании растворяются в воде, образуя вязкие растворы (коэффициент вязкости 10,17). Содержание Кс = 6,75%, Кэ = 3,78%, = 35,89%. Следовательно, ПВ являются низкоэтерифицированными, а достаточно высокое содержание свободных карбоксильных групп делает перспективным данный растительный объект для выделения пектинов с выраженными сорбционными свойствами, особенно в отношении ионов металлов.
На основании анализа выявленных характеристических полос поглощения в ИК–спектрах углеводных образцов можно сделать следующее заключение.
Практически во всех спектрах анализируемых фракций в областях 3300– 3700 см–1 наблюдается широкая и интенсивная полоса валентных колебаний, как первичных, так и вторичных OH–групп, ассоциированных внутри– и межмолекулярными водородными связями. Наличие данной полосы поглощения можно объяснить присутствием характерных донорно–акцепторных водородных связей гидроксила с замещенным гидроксилом. В области 2930-2810 см–1 находятся полосы валентных колебаний СН–групп.
Наличие выраженных полос валентных колебаний в областях 1758-1605 см–1 и 1479-1412 см–1 характерно для несимметричных и симметричных ионизированных карбоксильных групп соответственно, что предполагает присутствие кислот, прежде всего уроновых, по–видимому, связанных электростатической связью с ионами некоторых S–металлов.